| 查看: 6162 | 回复: 18 | |||
kjxyzxh001铜虫 (小有名气)
|
[求助]
提取的质粒跑出四条或者五条带，但酶切后只有一条带，是不是我的质粒污染了 已有1人参与
|
||
|
各位大虫，小弟最近扩增质粒，出现了怪现象，我的质粒转化的DH5a，挑取单克隆，再摇菌，提取质粒，跑胶发现质粒有很多条带，四条或者五条，就算是有超螺旋的和线性的，算起来也只有三条，不可能有四五条啊。我用BamH1 酶切（只有一个酶切位点），发现只有一条带。用EcoR1 酶切（只有一个酶切位点），也是一条带，用Sal 1 酶切（该质粒中无此酶酶切位点），发现切不开，条带和跑质粒一样。如果污染了其他质粒的话，用三种酶至少应该有个酶能切开污染的质粒吧，但都没发现杂带。如果没有污染其他质粒的话，质粒跑出来最多也是三条带啊，我这怎么出现了四五条。纠结啊…………，请各位给指点一二！ 图片中 P：质粒，大约5000bp。 Bam：BamH1酶切质粒 Sal: Sal1 酶切质粒 Eco：EcoR1酶切的质粒 两个方框是单独挑取的两个菌落分别提的质粒。最左边和中间的是Marker5000。  0.8%Agarose |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 杂项 |
» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有67人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助，将质粒导入细胞再提出来，两个质粒跑胶的结果不一样？
已经有5人回复
- 质粒酶切比较大小！求教
已经有3人回复
- Ecor Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切结果，目的条带有，可是另一条带比原来质粒还要大，怎么解释呢
已经有6人回复
- 酶切后跑出的条带这个样子，是酶的问题吗
已经有6人回复
- 质粒提取，结果出现四条、五条带，请大神指教！
已经有25人回复
- 求助，酶切之后，非但是没有产物，而且连原本的质粒也没跑出来
已经有6人回复
- 重组质粒，摇菌提取质粒后，如何测序？
已经有5人回复
- 为什么我提的质粒只有一条带？
已经有10人回复
- 提取质粒遇到多条带，求助
已经有19人回复
- 为什么单酶切切不开
已经有9人回复
- 空质粒双酶切后大小不对，纠结！
已经有11人回复
- 转化后提不出质粒
已经有11人回复
- 酶切之后跑回收胶总是没有条带是怎么回事呢
已经有9人回复
- 质粒提取有白色沉淀，跑胶却没条带，啥原因？
已经有24人回复
- 感受态细胞提取的质粒酶解后为什么带型不一样？
已经有12人回复
- 质粒提取后出现两条亮度相同的带，谁帮我看一下。。。。。。。
已经有6人回复
- 测序正确的质粒用SfiI酶切不动，请问有什么相关文献吗
已经有6人回复
- 菌液PCR没东西，但是提完质粒能跑出来条带，为什么啊？
已经有16人回复
- 提取的质粒A260/280是多少说明质粒的质量比较好？
已经有8人回复
- 污染与交叉污染、差错与混淆概念
已经有6人回复
- 【求助/交流】质粒提取线性化的很多
已经有8人回复
- 【求助/交流】质粒，酶切前比酶切后跑的还快，神了？？！！！
已经有15人回复
- 【求助/交流】纯化酶切后的膜蛋白做Western blot没条带，why？
已经有9人回复
- 【求助/交流】为什么条带很细啊？郁闷呢！
已经有9人回复
- 【求助/交流】Xhol 酶切不能切开
已经有13人回复
- 【原创】这是一条不归路么
已经有45人回复
酶切专家
金虫 (小有名气)
- MolEPI: 2
- 应助: 96 (初中生)
- 金币: 1610.8
- 红花: 4
- 帖子: 149
- 在线: 41.3小时
- 虫号: 1648414
- 注册: 2012-02-27
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2012-04-10 20:28:06
kjxyzxh001
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 44
- 散金: 1
- 红花: 1
- 帖子: 183
- 在线: 34.9小时
- 虫号: 1359803
- 注册: 2011-08-03
- 专业: 免疫识别/免疫耐受/免疫调
7楼2012-04-11 19:51:37
kjxyzxh001
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 44
- 散金: 1
- 红花: 1
- 帖子: 183
- 在线: 34.9小时
- 虫号: 1359803
- 注册: 2011-08-03
- 专业: 免疫识别/免疫耐受/免疫调
2楼2012-04-10 11:30:43
atlanticwi
金虫 (正式写手)
琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
- MolEPI: 25
- 应助: 138 (高中生)
- 金币: 141.2
- 散金: 350
- 红花: 13
- 帖子: 536
- 在线: 313.2小时
- 虫号: 1099992
- 注册: 2010-09-15
- 专业: 植物生理与生化
3楼2012-04-10 11:41:00
kjxyzxh001
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 44
- 散金: 1
- 红花: 1
- 帖子: 183
- 在线: 34.9小时
- 虫号: 1359803
- 注册: 2011-08-03
- 专业: 免疫识别/免疫耐受/免疫调
4楼2012-04-10 14:54:39
小婧子zj
金虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 2399.7
- 红花: 2
- 帖子: 275
- 在线: 94.2小时
- 虫号: 1233472
- 注册: 2011-03-15
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2012-04-10 17:08:29
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - MolEPI: 106
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16348.8
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3652
- 在线: 289小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
8楼2012-04-11 20:12:36
mlanqiang
木虫之王 (文学泰斗)
蓝博士
- 应助: 3409 (副教授)
- 金币: 55278.8
- 散金: 5498
- 红花: 62
- 帖子: 73916
- 在线: 730.8小时
- 虫号: 302202
- 注册: 2006-12-02
- 性别: GG
- 专业: 胶体与界面化学
9楼2012-04-11 20:43:33
小婧子zj
金虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 2399.7
- 红花: 2
- 帖子: 275
- 在线: 94.2小时
- 虫号: 1233472
- 注册: 2011-03-15
- 性别: MM
- 专业: 生物大分子结构与功能
10楼2012-04-12 10:23:08
