【答案】应助回帖

11楼2012-04-12 10:24:00

kjxyzxh001

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引用回帖:

10楼: Originally posted by 小婧子zj at 2012-04-12 10:23:08:
但是两个都和质量大小不一致呀

我有有点郁闷，老外给的序列是4800多BP,但这个条带明显不符，测序结果还没出来

12楼2012-04-13 11:44:05

kjxyzxh001

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谢谢各位高手的指点，为了确定到底是不是一个质粒，小弟做了S1酶酶切的脉冲场电泳，S1酶将所有质粒都切开变成了线性，所以有几条带就是几个质粒。小弟做了做了三次才做出来，结果显示果然有好几条带，所以可以确定有好几个质粒。

三个泳道都是用S1酶处理的菌体制作的胶块跑出来的PFGE图，

13楼2012-04-16 11:29:02

rego_wang

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

应该是质粒提取过程中出现的问题，不是质粒的污染

14楼2012-04-16 11:43:42

chchen123

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15楼2012-06-15 19:36:01

yixinyuan

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【答案】应助回帖

从图看同一个质粒酶切的，BamH1 和EcoR1 条带大小是一致的，所以不应该是污染，可能是提取质粒时手法不太小心，导致所提质粒以多种多形态存在，这种情况比较常见。再做一个双酶切看看，应该能说明问题，总的来说质粒的质量还是不太好的。

16楼2012-06-15 22:06:08

jqq1985

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【答案】应助回帖

说不定你的质粒是环套环形成了三连环，四连环的形式，不一定都是二聚啊。一旦切开了就分开了形成一条带。我觉得应该不是杂带污染。

17楼2012-06-16 17:15:27

pinmingyang

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你好，你的条带分的跟清晰，我想知道你的胶浓度是多少？？

18楼2014-07-07 11:07:16

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【答案】应助回帖

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kjxyzxh001: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2014-07-16 16:45:31

这么纠结实在不行重新提一次看看是自己操作原因还是菌本身的原因

19楼2014-07-07 15:53:08