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kjxyzxh001铜虫 (小有名气)
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提取的质粒跑出四条或者五条带，但酶切后只有一条带，是不是我的质粒污染了已有1人参与
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各位大虫，小弟最近扩增质粒，出现了怪现象，我的质粒转化的DH5a，挑取单克隆，再摇菌，提取质粒，跑胶发现质粒有很多条带，四条或者五条，就算是有超螺旋的和线性的，算起来也只有三条，不可能有四五条啊。我用BamH1 酶切（只有一个酶切位点），发现只有一条带。用EcoR1 酶切（只有一个酶切位点），也是一条带，用Sal 1 酶切（该质粒中无此酶酶切位点），发现切不开，条带和跑质粒一样。如果污染了其他质粒的话，用三种酶至少应该有个酶能切开污染的质粒吧，但都没发现杂带。如果没有污染其他质粒的话，质粒跑出来最多也是三条带啊，我这怎么出现了四五条。纠结啊…………，请各位给指点一二！ 图片中 P：质粒，大约5000bp。 Bam：BamH1酶切质粒 Sal: Sal1 酶切质粒 Eco：EcoR1酶切的质粒 两个方框是单独挑取的两个菌落分别提的质粒。最左边和中间的是Marker5000。  0.8%Agarose |
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12楼2012-04-13 11:44:05
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3楼2012-04-10 11:41:00
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