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Ecor Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切结果，目的条带有，可是另一条带比原来质粒还要大，怎么解释呢已有1人参与
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双酶切结果，切出来比原质粒还要大的条带，不明白，求解释 我的加样顺序依次1-8是Marker 5000,TE原质粒，TE酶切结果，TF原质粒，TF酶切结果，ED3质粒，ED3酶切结果，ED3酶切结果  Administrator 2014-05-16 15hr 52min.jpg |
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gyesang
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这种情况是因为，一般抽提的质粒有三种构象，线性，开环，超螺旋(超螺旋的越多，质粒质量越好)，虽然他们的分子量一样，但是在琼脂糖胶的泳动速度不同，由快到慢分别为：超螺旋>线性>开环 你的质粒用EcoRⅠ和Hind Ⅲ双酶切，虽然有目的条带，但是很小，大条带被线性化后即使减去这一小段序列，电泳泳动速度还是比超螺旋的慢，所以得到，另一条带比原来质粒还要大 看质粒大小时，将质粒单酶切线性化后电泳然后和marker进行比较才有意义 |
2楼2014-05-16 18:08:45
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gyesang
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