| 查看: 3312 | 回复: 6 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
[求助]
Ecor Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切结果，目的条带有，可是另一条带比原来质粒还要大，怎么解释呢 已有1人参与
|
||||
|
双酶切结果，切出来比原质粒还要大的条带，不明白，求解释 我的加样顺序依次1-8是Marker 5000,TE原质粒，TE酶切结果，TF原质粒，TF酶切结果，ED3质粒，ED3酶切结果，ED3酶切结果  Administrator 2014-05-16 15hr 52min.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有148人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 双酶切总是切不开。。。
已经有5人回复
- 连接效率低，重组质粒无法酶切
已经有5人回复
- EcoR1酶切体系
已经有11人回复
- 求去掉环状质粒中酶切位点和切后的质粒连接问题？
已经有7人回复
- 重组质粒酶切验证没有目的条带
已经有7人回复
- pMD18-T载体连接了目的片段后双酶切鉴定出现了好多条带 怎么回事?
已经有6人回复
- 我用sal Ⅰ和xho Ⅰ双酶切链接目的基因，菌落pcr能p出目的条带，但酶切切不开。
已经有18人回复
- 求高手帮助：EcoR I 和Nde I双酶切pET28a（+）的纯化问题
已经有10人回复
- 空质粒双酶切后大小不对，纠结！
已经有11人回复
- HInd III EcoR I双酶切问题
已经有14人回复
- 质粒酶切之后电泳呈弥散状是什么原因
已经有16人回复
- Hind111 与 Not1双酶切请教 急急急！！！
已经有13人回复
- 提取的质粒跑出四条或者五条带，但酶切后只有一条带，是不是我的质粒污染了
已经有18人回复
- 将质粒上紧挨着的两个酶切位点进行双酶切后连接外源基因片段，是不是不好连接？
已经有13人回复
- 质粒是否需要酶切后再电泳？
已经有9人回复
- 质粒DNA用EcoR1和HindⅢ双酶切后电泳图，求鉴
已经有6人回复
- 双酶切没出现目的条带，呈弥散型，有图，求助。
已经有7人回复
- 酶切质粒时，怎样鉴定质粒是否被切开了啊？
已经有6人回复
- 【求助/交流】质粒DNA可以不通过酶切直接跑电泳检测吗？
已经有24人回复
- 【求助/交流】质粒，酶切前比酶切后跑的还快，神了？？！！！
已经有15人回复
- 【求助/交流】双酶切电泳条带拖尾严重，什么原因啊？
已经有9人回复
- 【求助】请问一下Not Ⅰ和EcoRⅠ双酶切时该用什么buffer
已经有3人回复
- 【求助/交流】帮我看一下质粒单双酶切图！
已经有29人回复
- 【求助/交流】求助：电泳后提取的DNA酶切后反而出现一更高分子量条带
已经有5人回复
- 【求助/交流】双酶切质粒后，目的条带浅且前方有模糊亮带
已经有12人回复
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
-
专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 2.689
- 金币: 24334.9
- 散金: 1088
- 红花: 88
- 沙发: 2
- 帖子: 2327
- 在线: 623.1小时
- 虫号: 849017
- 注册: 2009-09-16
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
- 管辖: 分子生物
4楼2014-05-16 21:18:13
gyesang
荣誉版主 (著名写手)
-
专家经验: +24 - MolEPI: 31
- 应助: 599 (博士)
- 贵宾: 2.689
- 金币: 24334.9
- 散金: 1088
- 红花: 88
- 沙发: 2
- 帖子: 2327
- 在线: 623.1小时
- 虫号: 849017
- 注册: 2009-09-16
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
- 管辖: 分子生物
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-16 20:47:33
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-05-16 20:47:33
|
这种情况是因为，一般抽提的质粒有三种构象，线性，开环，超螺旋(超螺旋的越多，质粒质量越好)，虽然他们的分子量一样，但是在琼脂糖胶的泳动速度不同，由快到慢分别为：超螺旋>线性>开环 你的质粒用EcoRⅠ和Hind Ⅲ双酶切，虽然有目的条带，但是很小，大条带被线性化后即使减去这一小段序列，电泳泳动速度还是比超螺旋的慢，所以得到，另一条带比原来质粒还要大 看质粒大小时，将质粒单酶切线性化后电泳然后和marker进行比较才有意义 |
2楼2014-05-16 18:08:45
3楼2014-05-16 21:11:14
5楼2014-05-17 09:23:24
100