应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双酶切没出现目的条带，呈弥散型，有图，求助。
81/1返回列表
查看: 4218  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

supere23

新虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切没出现目的条带，呈弥散型，有图，求助。

切了三个小时，用的是takara的酶，Bamh1和Ecor1，buffer同一个，Ecor1的相对活性比较低，只要40。



[ Last edited by supere23 on 2011-5-23 at 16:20 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-05-23 16:16:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liukgg

木虫 (小有名气)
酶切的是质粒还是PCR产物？切之前跑过电泳吗？如果切之前没有问题的话那就看一下胶有没有问题
赞一下 回复此楼
山水凤凰
2楼2011-05-23 16:26:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-05-23 20:21:23
supere23(金币+1): 是质粒 2011-05-23 20:49:49
肿么是弥散状的呢？米有一点条带呀。。。

你酶切之前是什么东东啊？质粒还是PCR产物呢？

你的描述也过于简单了吧？

赶紧完善。。。
赞一下(1人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-05-23 16:30:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

supere23

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by supere23 at 2011-05-23 16:16:06:
切了三个小时，用的是takara的酶，Bamh1和Ecor1，buffer同一个，Ecor1的相对活性比较低，只要40。



[ Last edited by supere23 on 2011-5-23 at 16:20 ]

是质粒。。质粒电泳跑出来的条带可以的。。没什么问题
赞一下 回复此楼
4楼2011-05-23 20:49:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
弥散状，还都在下面，看起来像是DNA降解了。
你怎么连Maker都不跑啊？这样都不知道是电泳的问题还是酶切的问题啊
还有，下次同时跑一个没有酶切的质粒作对照。如果没有切的质粒ok，切过的是这样，那就是酶切时降解了。如果连没有切的质粒也这样，那就是电泳过程中被降解了，可考虑更换电泳缓冲液。
赞一下 回复此楼
5楼2011-05-23 22:19:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)
这两个酶有星活性，尤其是Bamh1，你还双酶切，很容易切成这样！用NEB的Bamh1-HF倒是可以，或建议分开切吧，要不就用大体系（100ul），可能会好一些。
赞一下 回复此楼
生命不息，探索不止。
6楼2011-05-24 17:48:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

36894256

金虫 (小有名气)
你还是验证原始质粒吧 模板你跑跑 估计有问题啊 切东西出问题是有条带的啊  你那根本什么没有 从做吧
赞一下 回复此楼
7楼2011-05-24 18:14:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wiln1

金虫 (小有名气)
切得时间太长了，缩短点时间试试。
赞一下 回复此楼
8楼2011-05-25 07:36:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 supere23 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +5 Tide man 2026-08-04 8/400 2026-08-04 11:43 by everxc
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 6/300 2026-08-04 11:36 by MWRYsWbJw4DE
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 6/300 2026-08-04 11:34 by MWRYsWbJw4DE
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 7/350 2026-08-04 11:31 by MWRYsWbJw4DE
[基金申请] 娱乐 +3 Tide man 2026-08-03 3/150 2026-08-04 09:58 by gltch
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 17/850 2026-08-04 09:46 by archvillain
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 f1dmPx051StA 2026-08-03 7/350 2026-08-04 09:31 by v1TJC4qJauAB
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 10/500 2026-08-04 09:26 by v1TJC4qJauAB
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 10/500 2026-08-04 09:15 by v1TJC4qJauAB
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 10/500 2026-08-04 08:05 by 88817753
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 9/450 2026-08-04 07:37 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 13/650 2026-08-04 07:30 by k7OM8YghWbkC
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 6/300 2026-08-04 06:10 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 6/300 2026-08-04 04:47 by k7OM8YghWbkC
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 03:21 by k7OM8YghWbkC
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +19 低垂的野花 2026-07-31 25/1250 2026-08-03 09:25 by gy116024
[基金申请] 微信指数没变化，科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭