应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » pMD18-T载体连接了目的片段后双酶切鉴定出现了好多条带 怎么回事?
71/1返回列表
查看: 3365  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jilabusha

木虫 (正式写手)

[求助] pMD18-T载体连接了目的片段后双酶切鉴定出现了好多条带 怎么回事?

T-18载体连接了1500bp的目的片段后，我用 EcoR I  和 Spt I 双酶切进行鉴定，电泳图如下，能帮我分析下这个电泳图吗?有泳道出现了好多条带的?我想不明白
pMD18-T载体连接了目的片段后双酶切鉴定出现了好多条带 怎么回事?
EcoR I  和 Spt I 双酶切鉴定.jpg
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验求助

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
天道酬勤
1楼 2013-08-07 08:50:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yhbletter

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
jilabusha(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-08-08 10:34:21
1，请解释一下你泳道的顺序
2，请确定你的目的片段里面没有这两个酶切位点。
赞一下 回复此楼
2楼2013-08-07 10:20:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maidi12

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
jilabusha(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-08-08 10:34:28
本帖内容被屏蔽
3楼2013-08-07 10:42:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jilabusha

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yhbletter at 2013-08-07 10:20:14
1，请解释一下你泳道的顺序
2，请确定你的目的片段里面没有这两个酶切位点。

不好意思  忘记补充了  这里Maker是DL5000的条带  依次是5000 3000 2000  1500  1000 750  500 250 200   第一泳道是Maker  后面的都是不同的转化子质粒 双酶切产物
赞一下 回复此楼
天道酬勤
4楼2013-08-07 17:54:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jilabusha

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by maidi12 at 2013-08-07 10:42:20
18T载体上带有好多酶切位点，建议你先看一下你的片段里面有没有这些酶切位点，如果有应该要避开使用这些酶

我不确定我的目的片段（16S rDNA)里面有没有这两个酶切位点  我只知道目的片段2端的序列
赞一下 回复此楼
天道酬勤
5楼2013-08-07 17:56:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maidi12

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
6楼2013-08-07 23:43:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cookee1981

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-08-08 10:34:42
jilabusha: 金币+3, ★★★★★最佳答案 2013-08-09 15:13:27
看你的电泳图，结果可能是这样的：你的酶切时间好像还不够充分吧，1-3号质粒没有插入目的片段，4号不管了，5-7号应该插入了目的片段，其中5号的酶切效果比较好，5-7号都可以送去测序。照图分析来说，你的目的片段在800bp左右包含了一个你所用的酶切位点，所以你的目的片段变成了800和600bp左右大小的两个小片段。一切还是以测序结果为准吧.
赞一下 回复此楼
7楼2013-08-08 08:46:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jilabusha 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学求调剂 +20 不知名的小卅 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 10:50 by 猪会飞
[考研] 材料调剂 +14 一样YWY 2026-04-06 14/700 2026-04-08 23:00 by 猪会飞
[考研] 机械专硕273请求调剂 +6 庚申壬申 2026-04-07 6/300 2026-04-08 22:41 by bljnqdcc
[考研] 专硕310求调剂 +7 捞捞我…. 2026-04-04 8/400 2026-04-08 20:24 by yutian743
[考博] 申博 +8 IQwQl 2026-04-04 8/400 2026-04-08 09:43 by 0608104024
[考研] 080100力学316求调剂 +3 L_Hairui 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:26 by JourneyLucky
[考研] 326求调剂 +5 9ahye 2026-04-02 6/300 2026-04-07 21:37 by lijunpoly
[考研] 297分083200求助 +9 aekx 2026-04-05 9/450 2026-04-06 20:57 by flysky1234
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 327求调剂 +4 拾光任染 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:16 by 南航~万老师
[考研] 296求调剂 +3 汪！？！ 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:13 by 啵啵啵0119
[考研] 344材料与化工调剂 +9 调剂上岸玘 2026-04-03 9/450 2026-04-04 23:10 by happyddm
[考研] 292求调剂 +11 2022080213 2026-04-04 13/650 2026-04-04 18:38 by macy2011
[考研] 348分环境工程·调剂 +10 吴彦祖24k 2026-04-03 11/550 2026-04-04 14:19 by 无际的草原
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +6 cs0106 2026-04-03 6/300 2026-04-04 11:20 by w_xuqing
[考研] 一志愿双非085502，267分，过四级求调剂 +3 再忙也要吃饭啊 2026-04-03 3/150 2026-04-04 05:03 by gswylq
[考研] 总分328生物与医药考数学求调剂 +7 aaadim 2026-04-02 9/450 2026-04-03 22:53 by syh9288
[考研] 一志愿重庆大学085404，总分314分，求调剂 +4 zf83hn 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:25 by 啵啵啵0119
[考研] 372分材料与化工（085600）一志愿湖南大学求调剂 +3 蓝笺片 2026-04-03 4/200 2026-04-03 17:58 by Jimmyandyou
[考研] 一志愿安徽大学0817化学工程与技术，求调剂 +14 我不是只因 2026-04-02 15/750 2026-04-03 09:49 by 蓝云思雨
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭