应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 急求:PCR 产物连接转化 涂板后就是不长 到底是怎么回事啊
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 2994  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wer0313

铁虫 (初入文坛)

[求助] 急求:PCR 产物连接转化 涂板后就是不长 到底是怎么回事啊

用PCR 产物做了三四次连接转化 一直都不长 用的是零背景载体 我让连接成功的人也给我做了次也没有做出来 后来用试剂盒中的control insert DNA作对照 还是没有长 感受态是好的 别人都用过 自己都不知道是哪儿出问题了 急求大神们帮小弟分析一下哇
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-05-17 11:32:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnyboylg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wer0313(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-17 14:46:29
最近我也在做，也有出现这些现象。我觉得楼主可以试试1、测测PCR产物核酸浓度，然后进行产物纯化；2、测测质粒酶切回收浓度，这是关键，如果浓度过低在连接时可多加点；3、用空质粒作对照看看能否长出来；4、做转化每步都很重要，得多做几次才可以。祝福楼主早点转化成功
赞一下(1人) 回复此楼
要么读书，要么旅行，身体和灵魂，必须有一个在路上
2楼2013-05-17 11:58:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

applewxy

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
wer0313(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-17 14:46:39
本帖内容被屏蔽
3楼2013-05-17 13:30:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wer0313

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sunnyboylg at 2013-05-17 11:58:36
最近我也在做，也有出现这些现象。我觉得楼主可以试试1、测测PCR产物核酸浓度，然后进行产物纯化；2、测测质粒酶切回收浓度，这是关键，如果浓度过低在连接时可多加点；3、用空质粒作对照看看能否长出来；4、做转化 ...

空质粒转化是不是也要按照5µ质粒+50µ 来做？
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-17 13:56:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnyboylg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

空质粒转化就是用未连接目的片段的质粒与感受态结合转化，其他条件和重组子转化一样
赞一下 回复此楼
要么读书，要么旅行，身体和灵魂，必须有一个在路上
5楼2013-05-17 14:02:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

傻瓜笨蛋4

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by wer0313 at 2013-05-17 11:32:40
用PCR 产物做了三四次连接转化 一直都不长 用的是零背景载体 我让连接成功的人也给我做了次也没有做出来 后来用试剂盒中的control insert DNA作对照 还是没有长 感受态是好的 别人都用过 自己都不知道是哪儿出问题了 ...

最近我也遇到这种情况，不知道你是怎么解决的，求指点

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2017-04-11 10:38:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wer0313 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] （调剂）一志愿报考哈尔滨工业大学0857资源与环境专业378分考生 +7 狠狠加油 2026-04-05 8/400 2026-04-06 16:52 by momo皓
[考研] 081700化学工程与技术 一志愿中海洋 323 求调剂学校 +18 披星河 2026-04-03 18/900 2026-04-06 13:55 by BruceLiu320
[考研] 308求调剂 +3 终不似从前 2026-04-05 3/150 2026-04-05 22:23 by hemengdong
[考研] 求调剂求调剂 +8 121. 2026-04-02 8/400 2026-04-05 20:15 by lys0704
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕 +10 @taotao 2026-03-30 10/500 2026-04-05 17:57 by jj987
[考研] 工科求调剂 +15 11ggg 2026-04-03 15/750 2026-04-05 16:24 by zzx2138
[考研] 求 +5 化工专硕323分 2026-04-04 5/250 2026-04-05 08:02 by 544594351
[考研] 材料专硕322分 +11 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-02 11/550 2026-04-04 23:37 by 永字号
[考研] 316求调剂 +9 墨辰_Orion926 2026-04-04 9/450 2026-04-04 21:35 by lbsjt
[考研] 277求调剂 +4 12A3 2026-04-02 5/250 2026-04-04 20:28 by 蓝云思雨
[考研] 调剂 +4 是可乐不是可乐 2026-04-04 4/200 2026-04-04 19:41 by 唐沐儿
[考研] 一志愿沪985，326分求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-03 3/150 2026-04-04 11:16 by 悲伤的芋头
[考研] 本9一志愿2 0854低分专硕286求调剂 +9 芒种111 2026-04-04 9/450 2026-04-04 11:01 by tangruihua
[考研] 289-求调剂 +4 这里是_ 2026-04-03 4/200 2026-04-03 14:23 by 1753564080
[考研] 085600专硕材料与化工348分求调剂 +10 上学啦！ 2026-04-01 11/550 2026-04-03 14:13 by 百灵童888
[考研] 313求调剂 +3 ～微微凉～ 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:25 by 啵啵啵0119
[考研] 08工科275分求调剂 +14 AaAa7420 2026-03-31 14/700 2026-04-03 11:13 by cocolv
[考研] 071000生物学调剂 +8 知昭蔓 2026-04-02 8/400 2026-04-03 10:36 by macy2011
[考研] 0856初试324分求调剂 +6 想上学求调 2026-04-01 6/300 2026-04-02 11:42 by 星空星月
[考研] 0710生物学求调剂 +9 manman511 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:00 by zxl830724
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭