应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 急求:PCR 产物连接转化 涂板后就是不长 到底是怎么回事啊
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 2995  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wer0313

铁虫 (初入文坛)

[求助] 急求:PCR 产物连接转化 涂板后就是不长 到底是怎么回事啊

用PCR 产物做了三四次连接转化 一直都不长 用的是零背景载体 我让连接成功的人也给我做了次也没有做出来 后来用试剂盒中的control insert DNA作对照 还是没有长 感受态是好的 别人都用过 自己都不知道是哪儿出问题了 急求大神们帮小弟分析一下哇
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-05-17 11:32:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnyboylg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wer0313(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-17 14:46:29
最近我也在做，也有出现这些现象。我觉得楼主可以试试1、测测PCR产物核酸浓度，然后进行产物纯化；2、测测质粒酶切回收浓度，这是关键，如果浓度过低在连接时可多加点；3、用空质粒作对照看看能否长出来；4、做转化每步都很重要，得多做几次才可以。祝福楼主早点转化成功
赞一下(1人) 回复此楼
要么读书，要么旅行，身体和灵魂，必须有一个在路上
2楼2013-05-17 11:58:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

applewxy

禁虫 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
wer0313(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，感谢你的慷慨解囊，期待你的精彩。 2013-05-17 14:46:39
本帖内容被屏蔽
3楼2013-05-17 13:30:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wer0313

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sunnyboylg at 2013-05-17 11:58:36
最近我也在做，也有出现这些现象。我觉得楼主可以试试1、测测PCR产物核酸浓度，然后进行产物纯化；2、测测质粒酶切回收浓度，这是关键，如果浓度过低在连接时可多加点；3、用空质粒作对照看看能否长出来；4、做转化 ...

空质粒转化是不是也要按照5µ质粒+50µ 来做？
赞一下 回复此楼
4楼2013-05-17 13:56:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunnyboylg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

空质粒转化就是用未连接目的片段的质粒与感受态结合转化，其他条件和重组子转化一样
赞一下 回复此楼
要么读书，要么旅行，身体和灵魂，必须有一个在路上
5楼2013-05-17 14:02:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

傻瓜笨蛋4

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by wer0313 at 2013-05-17 11:32:40
用PCR 产物做了三四次连接转化 一直都不长 用的是零背景载体 我让连接成功的人也给我做了次也没有做出来 后来用试剂盒中的control insert DNA作对照 还是没有长 感受态是好的 别人都用过 自己都不知道是哪儿出问题了 ...

最近我也遇到这种情况，不知道你是怎么解决的，求指点

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2017-04-11 10:38:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wer0313 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085404 293求调剂 +4 勇远库爱314 2026-04-06 4/200 2026-04-06 22:32 by chenzhimin
[考研] 273求调剂 +20 麦小叮当 2026-04-06 23/1150 2026-04-06 22:22 by 蓝云思雨
[考研] 284求调剂 +8 梵@@ 2026-04-06 8/400 2026-04-06 20:22 by hangsimei
[考研] 一志愿国科大信工所,英二数二408总分293分求调剂 +3 ilcyuan 2026-04-02 4/200 2026-04-06 16:35 by likeihood
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-05 5/250 2026-04-06 15:40 by lin-da
[考研] 求调剂 +4 wos666 2026-04-03 5/250 2026-04-06 15:22 by wos666
[考研] 材料334求调剂 +19 Eecho# 2026-04-03 19/950 2026-04-06 08:37 by 小小树2024
[考研] 301求调剂 +3 XYPLR 2026-04-05 4/200 2026-04-05 19:07 by XYPLR
[考研] 材料化工306分找合适调剂 +14 沧海轻舟e 2026-04-04 14/700 2026-04-05 09:53 by 朱云虎202
[考研] 331求调剂 +3 niby 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:56 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿华南师范361分，化学求调剂 +7 Nicole88888 2026-04-01 7/350 2026-04-04 18:28 by macy2011
[考研] 土木304求调剂 +4 兔突突突， 2026-03-31 4/200 2026-04-04 13:34 by 1753564080
[考研] 本科985，专业0812分336求调剂 +4 莫莫很行 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:31 by zhq0425
[考研] 求调剂 +8 akdhjs 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by 戴维ING
[硕博家园] 求老师收留 +9 lllq123 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:48 by 呼吸都是减肥
[考研] 土木304求调剂 +4 兔突突突， 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:16 by 兔突突突，
[考研] 362求调剂 +14 西南交材料专硕3 2026-03-31 14/700 2026-04-02 17:50 by yunlongyang
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-04-01 6/300 2026-04-02 15:49 by liumengping
[考研] 0710生物学，325求调剂 +3 mkkkkkl 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:48 by Jaylen.
[考研] 279求调剂 +6 学而思兮知 2026-04-01 6/300 2026-04-02 09:16 by vgtyfty
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭