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求助：请问做TOPO克隆时总是连接不上怎么回事啊？
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请教高手： 我用Pfu酶扩增得到大约500bp的片段，与TOPO载体连接时，连接转化后总是不长斑是怎么回事啊？ 有没有做过TOPO克隆的有什么好的经验指导一下啊？ |
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2楼2011-10-11 09:58:25
3楼2011-10-11 10:18:05
yuxia82012
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【答案】应助回帖
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TOPO vector 是invitrogen公司的一个TA克隆的质粒载体系列。http://tools.invitrogen.com/content/sfs/manuals/topota_man.pdf Pfu酶是高保真酶，扩增后不带A的，所以你扩增得到大约500bp的片段如果没有经过加A处理，是不能直接用于TOPO vector做TA克隆的。 |
5楼2011-10-11 14:47:04
xiaoshu8833
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xiaoshu8833
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9楼2011-10-14 18:27:05
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10楼2013-10-27 11:34:11