应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？
51/1返回列表
查看: 2196  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

飞侠8683

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？

这段时间做的连接转化到DH5α后，挑取单菌落进行PCR，能扩出目的片段，但是进一步提取质粒后跑电泳却比空质粒还小，跑到前面去了，是什么原因呢？好几次都是这样？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2010-12-06 14:17:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★
飞侠8683(金币+1): 2010-12-06 14:40:53
dhd997(金币+2):good 2010-12-06 15:54:24
质粒单酶切了么？
重组质粒和空质粒都单酶切成线性片段再比较大小
重组质粒还可以双酶切把插入片段切下来看看大小对不对
菌落PCR不如质粒酶切鉴定准确
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-12-06 14:19:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞侠8683

新虫 (小有名气)
谢谢！我现在也只能酶切试试看
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-06 14:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuqingchun33

银虫 (小有名气)
飞侠8683(金币+1): 2010-12-07 09:24:17
质粒的问题，线性，环状，跑的速度也不一样
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-06 16:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

head2004

新虫 (初入文坛)
我之前也做过菌落PCR鉴定，本来是没有连接成功，但PCR出来结果却有目的片段大小的条带，所以说菌落PCR并不是很可信。
建议最好是提质粒酶切鉴定，虽然麻烦一些
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-12-09 11:46:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 飞侠8683 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭