版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

调剂小程序

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3953)
>导师招生 (427)
>考研 (351)
>虫友互识 (234)
>文献求助 (202)
>休闲灌水 (104)
>考博 (82)
>硕博家园 (69)
>公派出国 (47)
>论文投稿 (45)
>博后之家 (40)
>论文道贺祈福 (39)
>教师之家 (29)
>招聘信息布告栏 (28)
>基金申请 (25)
>找工作 (23)

飞侠8683

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 582.9
帖子: 81
在线: 11.2小时
虫号: 715524

[交流] 【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？

这段时间做的连接转化到DH5α后，挑取单菌落进行PCR，能扩出目的片段，但是进一步提取质粒后跑电泳却比空质粒还小，跑到前面去了，是什么原因呢？好几次都是这样？

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

PCR扩增法制备低拷贝质粒（替代常规质粒提取）已经有11人回复
做酶切连接后转化再提质粒，质粒明显变小，Why??? 已经有24人回复
菌液PCR是阳性，却提不出来阳性质粒！求助已经有31人回复
质粒转化之后菌落的问题已经有9人回复
连接转化后菌落PCR验证出现非特异性扩增已经有5人回复
pcr产物测序和克隆之后重组质粒测序结果一样吗？已经有12人回复
荧光定量PCR中模板采用直接提取的DNA与构建目标片段质粒模板有什么区别？已经有6人回复
酵母质粒转化及提取验证问题求助已经有12人回复
【求助/交流】表达载体转化后,提取的质粒和原来不一样了啊已经有5人回复
【求助/交流】PCR纯化产物含有乙醇，可否直接用于质粒连接反应已经有6人回复
【求助/交流】质粒PCR产物的回收（质粒构建）已经有11人回复
【求助/交流】做连接后的质粒是否可以用来做pcr 已经有10人回复
【求助/交流】连接转化长菌有质粒，但是没有目的片段，怎么回事？？已经有20人回复
【问题反馈】一对引物扩出来的产物测序后竟然是很多质粒的PCR产物，再怎么区分呢？已经有10人回复
【求助/交流】质粒DNA提取后的PCR 已经有12人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2010-12-06 14:17:16

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★
飞侠8683(金币+1): 2010-12-06 14:40:53
dhd997(金币+2):good 2010-12-06 15:54:24

质粒单酶切了么？
重组质粒和空质粒都单酶切成线性片段再比较大小
重组质粒还可以双酶切把插入片段切下来看看大小对不对
菌落PCR不如质粒酶切鉴定准确

赞一下(1人)

2楼2010-12-06 14:19:59

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

飞侠8683

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 582.9
帖子: 81
在线: 11.2小时
虫号: 715524

谢谢！我现在也只能酶切试试看

3楼2010-12-06 14:41:39

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

xuqingchun33

银虫 (小有名气)

应助: 6 (幼儿园)
金币: 393.5
帖子: 157
在线: 76.7小时
虫号: 918005

飞侠8683(金币+1): 2010-12-07 09:24:17

质粒的问题，线性，环状，跑的速度也不一样

4楼2010-12-06 16:37:12

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

head2004

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 58
帖子: 4
在线: 2.5小时
虫号: 910134

我之前也做过菌落PCR鉴定，本来是没有连接成功，但PCR出来结果却有目的片段大小的条带，所以说菌落PCR并不是很可信。
建议最好是提质粒酶切鉴定，虽然麻烦一些

赞一下(1人)

5楼2010-12-09 11:46:43

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

相关版块跳转我要订阅楼主飞侠8683 的主题更新

最具人气热帖推荐 [查看全部]		作者	回/看	最后发表

	[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +6	Ncdx123456 2026-03-13	7/350	2026-03-16 07:44 by L135790
	[考研] 326求调剂 +3	mlpqaz03 2026-03-15	3/150	2026-03-16 07:33 by Iveryant
	[考研] 22408总分284求调剂 +3	InAspic 2026-03-13	3/150	2026-03-15 11:10 by zhq0425
	[考研] 311求调剂 +3	26研0 2026-03-15	3/150	2026-03-15 09:12 by JourneyLucky
	[考研] 289求调剂 +4	这么名字咋样 2026-03-14	6/300	2026-03-14 18:58 by userper
	[考研] 复试调剂 +4	z1z2z3879 2026-03-14	5/250	2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
	[考研] 一志愿浙江大学0856材料与化工求调剂 +4	yansheng@211 2026-03-09	5/250	2026-03-14 02:10 by JourneyLucky
	[考研] 0703求调剂 +7	jtyq001 2026-03-10	7/350	2026-03-14 01:06 by JourneyLucky
	[考研] 307求调剂 +7	超级伊昂大王 2026-03-10	7/350	2026-03-14 00:49 by JourneyLucky
	[考研] 311求调剂 +8	zchqwer 2026-03-10	8/400	2026-03-14 00:01 by JourneyLucky
	[考研] 279求调剂 +3	抓着星星的女孩 2026-03-10	3/150	2026-03-13 23:47 by userper
	[考研] 341求调剂 +4	番茄头--- 2026-03-10	4/200	2026-03-13 23:12 by JourneyLucky
	[考研] 材料与化工304求B区调剂 +5	邱gl 2026-03-11	6/300	2026-03-13 22:37 by JourneyLucky
	[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5	奕束光 2026-03-13	5/250	2026-03-13 22:00 by 星空星月
	[考研] 315求调剂 +9	小羊小羊_ 2026-03-11	10/500	2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
	[考研] 0703化学求调剂 +7	绿豆芹菜汤 2026-03-12	7/350	2026-03-13 17:25 by njzyff
	[考研] 一志愿211化学学硕310分求调剂 +8	努力奋斗112 2026-03-12	9/450	2026-03-13 15:41 by JourneyLucky
	[考研] 0817化学工程与技术考研312分调剂 +3	T123 tt 2026-03-12	3/150	2026-03-13 10:49 by houyaoxu
	[考研] 333求调剂 +3	152697 2026-03-12	4/200	2026-03-13 07:08 by Iveryant
	[考博] 2026年博士申请 +3	QwQwQW10 2026-03-11	3/150	2026-03-12 17:58 by gxch43