应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？
51/1返回列表
查看: 2465  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

飞侠8683

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？

这段时间做的连接转化到DH5α后，挑取单菌落进行PCR，能扩出目的片段，但是进一步提取质粒后跑电泳却比空质粒还小，跑到前面去了，是什么原因呢？好几次都是这样？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-12-06 14:17:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

head2004

新虫 (初入文坛)
我之前也做过菌落PCR鉴定，本来是没有连接成功，但PCR出来结果却有目的片段大小的条带，所以说菌落PCR并不是很可信。
建议最好是提质粒酶切鉴定，虽然麻烦一些
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-12-09 11:46:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★
飞侠8683(金币+1): 2010-12-06 14:40:53
dhd997(金币+2):good 2010-12-06 15:54:24
质粒单酶切了么？
重组质粒和空质粒都单酶切成线性片段再比较大小
重组质粒还可以双酶切把插入片段切下来看看大小对不对
菌落PCR不如质粒酶切鉴定准确
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2010-12-06 14:19:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞侠8683

新虫 (小有名气)
谢谢！我现在也只能酶切试试看
赞一下 回复此楼
3楼2010-12-06 14:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuqingchun33

银虫 (小有名气)
飞侠8683(金币+1): 2010-12-07 09:24:17
质粒的问题，线性，环状，跑的速度也不一样
赞一下 回复此楼
4楼2010-12-06 16:37:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 7/350 2026-11-11 13:44 by cdqGD6ftHmbl
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 5/250 2026-11-11 13:42 by cdqGD6ftHmbl
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 7/350 2026-11-11 13:33 by cdqGD6ftHmbl
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 4/200 2026-11-11 12:14 by gRND4NVAZ8VG
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 3/150 2026-11-11 11:38 by gRND4NVAZ8VG
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 3/150 2026-11-11 11:10 by 1Nb0IVlmV6v0
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 3/150 2026-11-11 10:57 by 1Nb0IVlmV6v0
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 5/250 2026-11-11 10:43 by 1Nb0IVlmV6v0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 6/300 2026-11-11 10:32 by 1Nb0IVlmV6v0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 13/650 2026-11-11 09:22 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-11 09:20 by Equinoxhua
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 5/250 2026-11-11 04:40 by Z7qfCsdIiD1T
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 6/300 2026-11-11 03:56 by Z7qfCsdIiD1T
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 FChKX8meu1ds 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:54 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 6/300 2026-11-11 01:10 by Z7qfCsdIiD1T
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭