应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】转化后涂板问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
111/2返回列表12下一页
查看: 3233  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

塞外雨

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】转化后涂板问题 已有7人参与

发现转化后，摇2个小时，涂板，过2-3个小时平板干了以后，一层白色的菌体。感受态是同一批，上周做还没事。其他步骤和试剂也没有换。
为什么？
现在一个板涂120微升也这样，之前涂300都没事呢。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
1楼 2010-05-14 10:30:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-05-14 12:28:04
可能这一次连接转染的效率都太高了，或者是平板抗性有问题，如果是前者，少涂或者划板就好了，如果是后者就要重新制备抗性平板

建议重新制备抗性平板，再做一次
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-05-14 10:34:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

塞外雨

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-05-14 10:34:41:
可能这一次连接转染的效率都太高了，或者是平板抗性有问题，如果是前者，少涂或者划板就好了，如果是后者就要重新制备抗性平板

建议重新制备抗性平板，再做一次

已经重复4次了，一天做一遍，越涂越少，可是没啥起色。
之前就是得不到转化子，或者长的转化子验证也不对。
这周突然这样了
赞一下 回复此楼
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
3楼2010-05-14 10:38:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
重新做好了～
回复此楼
4楼2010-05-14 10:52:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoboxia

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-14 12:28:19
平板抗性有问题，如果是前者，少涂或者划板就好了，如果是后者就要重新制备抗性平板

加油
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-05-14 11:04:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoru2010

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 塞外雨 at 2010-05-14 10:30:02:
发现转化后，摇2个小时，涂板，过2-3个小时平板干了以后，一层白色的菌体。感受态是同一批，上周做还没事。其他步骤和试剂也没有换。
为什么？
现在一个板涂120微升也这样，之前涂300都没事呢。

我的是什么都不长了……请问你连接时加了几微升的DNA连接了多久？还有涂板怎么涂？是涂匀就行吗？涂完是不是在超净台半开盖晾干？晾多久？100微升菌液
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-05-14 11:08:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cqyniu

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-14 12:28:28
应该是你的平板的抗生素出问题了，我以前也遇到过，后来用了新的抗生素，就没问题了，正常了。祝你好运
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2010-05-14 11:11:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlf
amisking:严禁纯表情发帖！ 2010-05-14 12:29:13
8楼2010-05-14 11:21:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):欢迎继续交流！ 2010-05-14 12:29:23
引用回帖:
Originally posted by xiaoru2010 at 2010-05-14 11:08:31:

我的是什么都不长了……请问你连接时加了几微升的DNA连接了多久？还有涂板怎么涂？是涂匀就行吗？涂完是不是在超净台半开盖晾干？晾多久？100微升菌液

我试过彻底涂干，和涂匀正放半小时后倒置这两种方法，感觉前者浪费一点时间，但是效果比后者好。为了节省时间，制备平板的时候，稍微晾干点，但也不能太干，防止培养时会干裂
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2010-05-14 12:23:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

塞外雨

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by xiaoru2010 at 2010-05-14 11:08:31:

我的是什么都不长了……请问你连接时加了几微升的DNA连接了多久？还有涂板怎么涂？是涂匀就行吗？涂完是不是在超净台半开盖晾干？晾多久？100微升菌液

连接比例按照回收后两者的浓度和片段大小计算的，你在网上查一下，能查到计算公式。
过夜连接，使用的宝生物的。涂板就加一定量转化后菌液，直接涂，涂匀，培养箱正放之干，倒置。
赞一下 回复此楼
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
10楼2010-05-14 13:57:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 塞外雨 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856材料化工调剂 总分330 +14 zhubinhao 2026-03-27 14/700 2026-03-29 10:01 by Sjndkwm
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +11 Mr. Z 2026-03-25 11/550 2026-03-29 08:14 by 无际的草原
[考研] 289求调剂 +13 新时代材料 2026-03-27 13/650 2026-03-29 01:16 by 544594351
[考研] 0703 化学 求调剂，一志愿山东大学 342 分 +4 Shern—- 2026-03-28 4/200 2026-03-29 00:47 by 544594351
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +4 小张zxy张 2026-03-26 8/400 2026-03-28 19:25 by lbsjt
[考研] 311（085601）求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 394求调剂 +3 好事多磨静候佳� 2026-03-26 5/250 2026-03-28 14:24 by 唐沐儿
[考研] 322求调剂 +5 旧吢 2026-03-24 5/250 2026-03-28 13:26 by Iveryant
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 339求调剂，想调回江苏 +6 烤麦芽 2026-03-27 8/400 2026-03-28 10:40 by 烤麦芽
[考研] 275求调剂 +10 jjjjjjjjjjl 2026-03-27 10/500 2026-03-27 23:47 by barnett0632
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 材料292调剂 +12 橘颂思美人 2026-03-23 12/600 2026-03-27 15:44 by caszguilin
[考研] 324求调剂 +5 hanamiko 2026-03-26 5/250 2026-03-27 10:33 by wangjy2002
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭