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【求助/交流】转化后涂板问题
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塞外雨
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[交流]
【求助/交流】转化后涂板问题
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发现转化后,摇2个小时,涂板,过2-3个小时平板干了以后,一层白色的菌体。感受态是同一批,上周做还没事。其他步骤和试剂也没有换。
为什么?
现在一个板涂120微升也这样,之前涂300都没事呢。
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只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
1楼
2010-05-14 10:30:02
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yujiaping1
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):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1):欢迎继续交流! 2010-05-14 12:29:23
引用回帖:
Originally posted by
xiaoru2010
at 2010-05-14 11:08:31:
我的是什么都不长了……请问你连接时加了几微升的DNA连接了多久?还有涂板怎么涂?是涂匀就行吗?涂完是不是在超净台半开盖晾干?晾多久?100微升菌液
我试过彻底涂干,和涂匀正放半小时后倒置这两种方法,感觉前者浪费一点时间,但是效果比后者好。为了节省时间,制备平板的时候,稍微晾干点,但也不能太干,防止培养时会干裂
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9楼
2010-05-14 12:23:00
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yujiaping1
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):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-05-14 12:28:04
可能这一次连接转染的效率都太高了,或者是平板抗性有问题,如果是前者,少涂或者划板就好了,如果是后者就要重新制备抗性平板
建议重新制备抗性平板,再做一次
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2楼
2010-05-14 10:34:41
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Originally posted by
yujiaping1
at 2010-05-14 10:34:41:
可能这一次连接转染的效率都太高了,或者是平板抗性有问题,如果是前者,少涂或者划板就好了,如果是后者就要重新制备抗性平板
建议重新制备抗性平板,再做一次
已经重复4次了,一天做一遍,越涂越少,可是没啥起色。
之前就是得不到转化子,或者长的转化子验证也不对。
这周突然这样了
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3楼
2010-05-14 10:38:59
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xiaoboxia
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1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-14 12:28:19
平板抗性有问题,如果是前者,少涂或者划板就好了,如果是后者就要重新制备抗性平板
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5楼
2010-05-14 11:04:59
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