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求助:转化DH5a涂平板后总是有一层黄色的膜敷在平板上
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m.c1002
金虫
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性别: GG
专业: 微生物遗传育种学
[
求助
]
求助:转化DH5a涂平板后总是有一层黄色的膜敷在平板上
小弟刚进实验室,做转化,涂完平板后过夜培养,平板上总是有一层黄色的膜覆盖在平板上,而且没有菌落长出来,目前已经确定质粒和感受态都没有问题,虫友们有没有遇到过这种情况,到底是哪方面的问题?实验做不出来,郁闷啊。
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环境影响人,但人可以选择和创造环境!
1楼
2011-10-24 22:21:29
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healerly
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m.c1002(金币+1): 额,当时没想到拍张照,现在正在做转化,如果还是这种结果就拍张照。 2011-10-25 09:18:05
m.c1002(金币+4): 培养基没有配错,别人都能做出来。 2011-10-25 09:21:15
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2楼
2011-10-24 23:09:40
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清风寨
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专业: 细胞生物学研究中的新方法
【答案】应助回帖
m.c1002(金币+5): 我没有用蓝白筛选,只用了amp抗性,而且amp应该没问题的,因为别人都做出来了。 2011-10-25 09:20:31
你是不是涂了 IPTG和Xgal 我们实验室曾经因为Xgal出问题涂的板子上面就有一层黄色东西 建议你换换Xgal
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冷风过心变热
3楼
2011-10-25 08:35:09
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healerly
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4楼
2011-10-25 20:11:46
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三目
木虫
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专业: 植物生殖生物学
【答案】应助回帖
m.c1002(金币+5): 之前网上看到说有这个原因,下次试试降低一下浓度,谢谢帮忙,呵呵。 2011-10-25 22:07:13
是你的菌液浓度太大了,连成片了,所以根本分不开菌落(本人做的时候经常遇到这种情况),建议降低感受态浓度(或是涂的菌液的浓度),或者可以用涂布棒取连片的菌涂到新的平板上(只要一点点就可以了)
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5楼
2011-10-25 21:41:46
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喵喵与咩咩
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wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-10-27 11:18:49
m.c1002(金币+5): 问题已经找到了,谢谢参与 2011-10-27 17:49:46
我有遇到过,培养基里有多酚存在,可以考虑加PVP结合多酚
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生命不息,奋斗不止
6楼
2011-10-27 00:49:45
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xiaohaozi9876
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注册: 2008-05-26
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【答案】应助回帖
m.c1002(金币+5): 问题已经解决了,是抗生素失效了,谢谢了 2011-11-01 12:26:54
原因可能有2点:
1. plate中的抗生素失效,导致长满感受态的E.coli
2. 涂得菌液太多,建议100ul,200ul,300ul,400ul各一张,看看效果
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Onceinamoment,wethinkoneselfgrowup,oneday,wefinallyfound...
7楼
2011-10-31 16:32:13
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