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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：转化DH5a涂平板后总是有一层黄色的膜敷在平板上
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m.c1002

金虫 (小有名气)

[求助] 求助：转化DH5a涂平板后总是有一层黄色的膜敷在平板上

小弟刚进实验室，做转化，涂完平板后过夜培养，平板上总是有一层黄色的膜覆盖在平板上，而且没有菌落长出来，目前已经确定质粒和感受态都没有问题，虫友们有没有遇到过这种情况，到底是哪方面的问题？实验做不出来，郁闷啊。
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环境影响人，但人可以选择和创造环境！
1楼 2011-10-24 22:21:29
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healerly

禁虫 (小有名气)
m.c1002(金币+1): 额，当时没想到拍张照，现在正在做转化，如果还是这种结果就拍张照。 2011-10-25 09:18:05
m.c1002(金币+4): 培养基没有配错，别人都能做出来。 2011-10-25 09:21:15
本帖内容被屏蔽
2楼2011-10-24 23:09:40
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清风寨

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

m.c1002(金币+5): 我没有用蓝白筛选，只用了amp抗性，而且amp应该没问题的，因为别人都做出来了。 2011-10-25 09:20:31
你是不是涂了 IPTG和Xgal  我们实验室曾经因为Xgal出问题涂的板子上面就有一层黄色东西  建议你换换Xgal
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冷风过心变热
3楼2011-10-25 08:35:09
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healerly

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2011-10-25 20:11:46
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三目

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

m.c1002(金币+5): 之前网上看到说有这个原因，下次试试降低一下浓度，谢谢帮忙，呵呵。 2011-10-25 22:07:13
是你的菌液浓度太大了，连成片了，所以根本分不开菌落（本人做的时候经常遇到这种情况），建议降低感受态浓度（或是涂的菌液的浓度），或者可以用涂布棒取连片的菌涂到新的平板上（只要一点点就可以了）
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5楼2011-10-25 21:41:46
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喵喵与咩咩

铁杆木虫 (著名写手)

要把生活过成诗和远方

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-10-27 11:18:49
m.c1002(金币+5): 问题已经找到了，谢谢参与 2011-10-27 17:49:46
我有遇到过，培养基里有多酚存在，可以考虑加PVP结合多酚
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生命不息，奋斗不止
6楼2011-10-27 00:49:45
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xiaohaozi9876

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

m.c1002(金币+5): 问题已经解决了，是抗生素失效了，谢谢了 2011-11-01 12:26:54
原因可能有2点：
1. plate中的抗生素失效，导致长满感受态的E.coli
2. 涂得菌液太多，建议100ul，200ul，300ul，400ul各一张，看看效果
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Onceinamoment,wethinkoneselfgrowup,oneday,wefinallyfound...
7楼2011-10-31 16:32:13
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