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gaogaominghui

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】大肠杆菌在营养琼脂上培养生长的平板计数问题已有14人参与

大家好~ 求助~~
最近在实验中,碰到了很奇怪的问题,不知道怎么回事,无法解释。

1。大肠杆菌在营养琼脂上,30°C,生长24h,一个colony都没有长出来!
2。大肠杆菌稀释的倍数,1:1 有200,300,400,500个不等,可是1:10 的,却一个都没有!
3。 稀释的倍数,有时候1:10的一个都没有,但是1:100的却有很多!

这到底是怎么回事啊?我觉得在操作过程中,稀释倍数什么的,都没有错误啊,在涂布的时候,也很注意,可是怎么就出现这种情况呢?

虫子们有没有遇到过这样的问题啊?请帮助~~ 非常谢谢了~
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yushanyou12

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
gaogaominghui(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+3):解释的不错~~ 2010-06-09 15:57:18
虽说细菌生长的适宜温度是30-35度,但是你不要用30度啊,你用高点的温度如34度试试。还有就是可以用检测控制菌的温度培养36-37度。

低倍数下不生长,这个问题你可以考虑用低倍数稀释,因为你的初始菌浓度太低了,你用5倍稀释看看,能不能有较好的稀释生长曲线。

1:10的一个都没有,但是1:100的却有很多,这种情况的话你可以考虑菌液里是否有抑菌的物质。你应该从菌的获得、稀释液、实验方法等方面来考虑,是什么抑菌。解释是低倍数下抑菌物质含量高抑制菌生长,稀释后抑菌物质含量降低,不再抑制菌生长。
今夜的寂寞,让我如此美丽。
7楼2010-06-09 13:26:16
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):maybe 2010-06-09 16:09:59
楼上说的都很好了,总不至于1:10的先做,涂布棒太热,都把菌烫死了吧。
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
9楼2010-06-09 15:25:42
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普通回帖

gaogaominghui

银虫 (小有名气)

自己顶一下,虫子们帮帮忙~~
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2楼2010-06-09 12:10:23
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srlee

铁杆木虫 (小有名气)

★ ★
gaogaominghui(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+1):good! 2010-06-09 12:31:16
如果试验条件都一致的话,可能是稀释过程中的操作问题引起的,如取液不均一,稀释过程没有摇匀,多做几个重复,取可信度比较高的板计数,要保证实验具有可重复性,计数在某个数量级范围内有误差还是可以理解的。祝实验顺利成功!
3楼2010-06-09 12:17:59
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priorpost06

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
gaogaominghui(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-06-09 15:58:00
一,大肠杆菌的最适合生长温度是37 ℃。培养问题应该不是太大。
二,稀释的时候一定要混匀,取样要均匀。建议使用漩涡振荡器。操作不要太快,尽量混匀,再做下一步。
4楼2010-06-09 12:48:28
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zhiyuanjyf

木虫 (正式写手)

★ ★
gaogaominghui(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+1):有道理~~ 2010-06-09 15:56:12
稀释时漩涡震荡一下。。。
一定要混匀。。。
重复几次。。。
做个1:5的。。
和1:50的。。。
5楼2010-06-09 12:51:18
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j2

木虫 (正式写手)


gaogaominghui(金币+1):谢谢参与
为什么用30℃捏?不是37℃么
稀释时混匀取菌液应该没问题的啊
修炼ing,当虫仙……
6楼2010-06-09 13:05:26
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知秋

至尊木虫 (著名写手)

多几个重复试下哈
8楼2010-06-09 14:02:03
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gaogaominghui

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by srlee at 2010-06-09 12:17:59:
如果试验条件都一致的话,可能是稀释过程中的操作问题引起的,如取液不均一,稀释过程没有摇匀,多做几个重复,取可信度比较高的板计数,要保证实验具有可重复性,计数在某个数量级范围内有误差还是可以理解的。祝 ...

非常谢谢~~ ^_^
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10楼2010-06-09 15:30:03
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