应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大肠杆菌发酵问题
291/3返回列表123下一页
查看: 7173  |  回复: 28
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

fushxmy

金虫 (正式写手)

[交流] 大肠杆菌发酵问题 已有19人参与

最近搞一个大肠杆菌的发酵项目，接种量是10%，初始OD是0.2，经过在发酵罐里30%的溶氧下培养至OD为8时加入0.2mM的IPTG进行诱导发酵，并且开始进行补料，经过24小时之后，OD达到20，之后的几天基本上保持在这个水平不变。下批发酵我准备提高初始OD至0.5，主要是通过摇瓶培养OD只能达到5左右，10%的接种量所以说OD只有0.5。不知道大家是如何提高OD量的，理论上E.coli在发酵罐里OD600可以达到100。下面是我的培养基配方：

种子培养基：1L

Glucose        10g;    KH2PO4    3g;      MgSO4.7H2O      0.5g;    Yeast extract        10g; NaCl         0.5g;    NH4Cl       1g

发酵培养基：1L
KH2PO4 2g;  K2HPO4 3g; (NH4)2SO4 5g; yeast extract 5g; antifoam 1ml;
Glucose 20g (恒定); MgSO4.7H2O 0.5g; VB 1mg; K12 trace metals 1ml;

用液氨调节pH=7.0
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
秦皇汉武
1楼 2011-07-08 11:17:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xiajungang

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
再过一两个月，我也要用发酵罐来做大肠杆菌诱导表达了，目前用的摇瓶，培养基为LB，希望与LZ多多交流。建议LZ往培养基加些微量元素混合液，如Fe, Mg。牛肉膏，玉米浆等均要加些。我们实验室培养的OD600最高可达到80。
赞一下(2人) 回复此楼
吃苦耐劳，勇于创新，乐观热情，积极向上！
3楼2011-07-09 21:27:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dami200

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
是不是灭菌不完全啊，镜检怎么样啊，
赞一下(2人) 回复此楼
积极向上
4楼2011-07-09 22:22:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

94394220

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
理论上？那有具体的实例吗？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-07-08 14:21:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fushxmy

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 94394220 at 2011-07-08 14:21:23:
理论上？那有具体的实例吗？

请问你们组里培养基是什么配方啊？谢谢
赞一下 回复此楼
秦皇汉武
5楼2011-07-11 22:27:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sspxiaoji

银虫 (正式写手)
诱导早了
回复此楼
6楼2011-07-11 22:52:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fushxmy

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by sspxiaoji at 2011-07-11 22:52:09:
诱导早了

能展开说说吗？谢谢
赞一下 回复此楼
秦皇汉武
7楼2011-07-12 02:46:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

包工头林冲

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
可以加玉米浆，豆饼水解液，等
少加消泡剂，还有就是你的溶氧一直维持在30吗？
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-07-16 20:59:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

toto2to

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
培养温度是多少？感觉不是初始OD的问题，补料培养基是什么？VB是VB几？还是复合型的VB？
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-07-17 01:09:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fushxmy

金虫 (正式写手)
谢谢大家，OD问题已经搞定了，现在主要是想办法控制生长速度，因为我这个代谢产物是跟生长偶联的，只有当细胞在继续生长状态才会生产目的产物。大家有什么好的建议吗？
赞一下 回复此楼
秦皇汉武
10楼2011-07-17 11:55:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fushxmy 的主题更新
291/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] 明天应该可查了！？ +5 chengyan1220 2026-08-23 5/250 2026-08-24 23:28 by 我4大白菜
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +7 scalable 2026-08-24 7/350 2026-08-24 23:01 by anata1209
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤？
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭