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[交流]
大肠杆菌发酵液的防菌
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| 弄了一批大肠杆菌(工程菌)的发酵液,pH6.5,加什么防菌比较好,可能起始的菌落总数有10的8次方,因为离心分离的转速很低4500,希望大家能多多提些建议,谢谢啦! |
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大肠杆菌工程菌发酵 |
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2楼2011-10-20 12:02:40
3楼2011-10-20 16:19:52
4楼2011-10-20 21:36:32
5楼2011-10-20 21:37:28
6楼2011-10-21 08:26:26
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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
wu2008yao(金币+1): 我要发酵液而非菌种,不过谢谢了! 2011-10-21 09:39:19
scelab(金币+5): 辛苦总结了,不过确实不是。lz所问。要不你单独把此内容开贴,呵呵 2011-10-21 11:36:49
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
wu2008yao(金币+1): 我要发酵液而非菌种,不过谢谢了! 2011-10-21 09:39:19
scelab(金币+5): 辛苦总结了,不过确实不是。lz所问。要不你单独把此内容开贴,呵呵 2011-10-21 11:36:49
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这是我总结了好多人的观点,也有我自己的观点,你看看吧,应该对你有用处。或者你把你的菌先平板画线分离,然后进行保藏,效果肯定非常的好。^_^还有好几篇关于菌种保藏的资料,看看吧^_^ 如果用50%甘油生理盐水可保存更长时间。 如果有条件的话,菌种最好保存在-70,30-50%甘油可以保存半年左右。另外,如果是表达基因重组蛋白那就多提点质粒吧,质粒很容易保存,菌种不行了及时转化,反正也不麻烦。 本人的菌种负70度保存了N年一点问题都没有。负20度冰柜也问题不大。最怕的是那种有冷冻冷藏的冰箱,两三个月肯定基本完完。我们实验室的都保存了一两年都壮壮的,进甘油管前的菌浓度要浓缩一点。我实验室的保存3年也没有问题,我认为主要是你的冰箱温度不够低,一般用30~50%的甘油在-30℃以下的冰箱可以保存几年。-20℃的冰箱肯定保存不了多久. 不要反复冻融! 稳定的低温对甘油保存是很重要的。 其实,如果果真要长期保存菌种,最好就是冻干保存。 如果短期保存,做穿刺管几个月是没有问题的,4度保存就可以,制作和保存都很方便。 终浓度15%左右的甘油管-20保存三四个月问题不大,半年就不太好了 甘油的浓度在20-50%这个范围就可以,但关键是温度最好是在-70℃以下,其保存时间至少在1年以上。要长期保存的话,冻干保存是最理想的了。 我们用的甘油的浓度在20%,保存在-80℃的冰箱里,可以长期保存。注意在保存时菌液和甘油要混溶。 用灭菌的滤纸片涂上大肠杆菌,放进灭菌的一次性塑料尖咀离心管(1.5ml)内,置普通冰箱的冷冻室冷冻保存,此种保存方法可将菌种保存至少一年半以上,不妨试一试。 最好的办法就是把它进行冻干,可以保存数年不减毒力,我的大肠杆菌冻干保存了七年还好着呢. 最好的办法就是把它进行冻干,可以保存数年不减毒力,我的大肠杆菌冻干保存了七年还好着呢. 我用20%甘油肉汤,在-80 保存多年,且反复动融,至今长的很好 20%-50%的浓度是不是高了点啊?实验室的某些质粒感觉用25%的甘油保存,放几个月就OVER了啊? 用甘油保存于-70度,取出接种时,不要等它完全冻融,部分冻融后立即接种,剩下部分立即再置回冰箱中,这可避免反复冻融带来的对细菌的破坏。 |
7楼2011-10-21 08:37:23
8楼2011-10-22 10:43:00












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