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SAFC

铁虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】蛋白酶在大肠杆菌表达在牛奶平板上有透明圈,液体诱导却无酶活 已有4人参与

帮忙。非常感谢
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)

★ ★
lstt09nk(金币+2):欢迎回来交流~~ 2010-06-02 18:44:33
SAFC(金币+1): 2010-06-08 22:43:43
可能的情况是有透明圈但不是由于蛋白酶水解而产生的,液体诱导没酶活有可能是酶活较低测不出来或者发酵条件不对
2楼2010-06-02 00:14:04
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85715623

木虫 (正式写手)

SAFC(金币+1): 2010-06-08 22:43:29
大肠杆菌表达一般都是包涵体,没有设么活性的,建议更换表达载体。
3楼2010-06-02 07:23:11
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zhjp326

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢分享经验~~ 2010-06-02 18:44:54
SAFC(金币+1): 2010-06-08 22:43:21
有透明圈不一定有酶活啊,我的酶就是这样,后来测了反应1h的就有活性了,估计是大肠杆菌外泌蛋白不多,活性不够,所以难检测,可是试下多培养几天和上清酶液浓缩延长反应时间。
4楼2010-06-02 10:12:45
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freshblack

金虫 (正式写手)

SAFC(金币+1): 2010-06-08 22:42:49
同意楼上的~
试试改变发酵条件、取样时间,做个正交实验看看~
勤有功,戏无益,满招损,谦得益
5楼2010-06-02 10:52:16
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
还得看看诱导多久,诱导剂多大浓度。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
6楼2014-01-30 21:28:03
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