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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 为什么用大肠杆菌表达蛋白
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lirongrong

银虫 (小有名气)

[求助] 为什么用大肠杆菌表达蛋白

我表达蛋白的目的是要得到大量的该蛋白。
问题是为什么用大肠杆菌表达蛋白，而不是将构建好的质粒转进原菌株（非大肠杆菌）里面表达？
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小木虫论坛-学习生活乐园
1楼 2013-03-14 11:51:32
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jiangyhai

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lirongrong: 金币+1 2013-03-26 15:06:02
菌只是表达体系中的表达宿主，不同的表达系统表达载体和表达宿主是对应的。如果你的原菌有很好的表达载体当然也可以。
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静心做事。
2楼2013-03-14 12:51:07
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xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
lirongrong: 金币+1 2013-03-26 15:06:27
大肠杆菌的兼容性比较好，技术也比较成熟，目前用的表达载体也较多时食欲在大肠杆菌中表达，且表达的蛋白量甚至可以高达菌体总蛋白的30%
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3楼2013-03-14 12:53:42
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oylb

禁言 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
4楼2013-03-14 12:59:56
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lirongrong

银虫 (小有名气)
原菌株里面表达并纯化得到的蛋白与使用大肠杆菌的蛋白会不会有些不同？
用原菌株得到蛋白并做下一步研究，并得到结果，同行会不会认同？
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小木虫论坛-学习生活乐园
5楼2013-03-14 13:32:36
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lirongrong: 金币+6, ★★★很有帮助 2013-03-26 15:05:20
引用回帖:
5楼: Originally posted by lirongrong at 2013-03-14 13:32:36
原菌株里面表达并纯化得到的蛋白与使用大肠杆菌的蛋白会不会有些不同？
用原菌株得到蛋白并做下一步研究，并得到结果，同行会不会认同？

其实如果能在原菌株表达的话，可能会比用大肠杆菌还好。因为有些蛋白需要一些特定的修饰才能有活性，而很多修饰功能大肠杆菌往往不具备。大肠杆菌做表达背景清楚，可以大量诱导表达。但用原菌株表达出来的蛋白和native形式更接近。如果你可以在原菌株表达足够的蛋白而进一步研究的话，我觉得完全没有问题。
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6楼2013-03-14 13:43:48
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