24小时热门版块排行榜    

查看: 2226  |  回复: 9

wanghr595

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】蛋白质提取以后应如何存放才能保证活性不变啊

我想用大肠杆菌BL21大量表达一些酶蛋白,然后要等做完下一步实验才用到这些蛋白,怎么都不能将两步实验的时间放在一起,只能先将蛋白质提取出来保存到用时,但是怎么保存才能保证酶不失效啊?我查了一些文献,好多都是直接用液氮直接冷冻后-20保存,我想知道有没有其他的方法啊?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)

★ ★
scelab(金币+2):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-08-30 21:22:43
保持蛋白的活性没有同一的方法,你只能根据蛋白酶的性质进行保存,比如说假如防腐剂,合适的缓冲溶液,冻干,保护剂等。
52187644
2楼2010-08-30 19:30:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elvias

铁杆木虫 (正式写手)

wanghr595(金币+1): 2010-08-31 09:51:44
直接冻在液氮里最好~也可以液氮处理后冻在-80,-20不很保险
3楼2010-08-30 19:31:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)


wanghr595(金币+1): 2010-08-31 09:51:40
silicare(金币+1):谢谢参与 2010-08-31 12:03:28
引用回帖:
Originally posted by wanghr595 at 2010-08-30 17:03:14:
我想用大肠杆菌BL21大量表达一些酶蛋白,然后要等做完下一步实验才用到这些蛋白,怎么都不能将两步实验的时间放在一起,只能先将蛋白质提取出来保存到用时,但是怎么保存才能保证酶不失效啊?我查了一些文献,好多 ...

基本原则:蛋白浓度应该1mg/ml以上,可以加入30%左右的甘油放入-20进行保存,如果只是一周左右的时间,4度一般也是可以的。
4楼2010-08-30 19:35:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanghr595

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by elvias at 2010-08-30 19:31:24:
直接冻在液氮里最好~也可以液氮处理后冻在-80,-20不很保险

是啊,上次我直接放在-20了,过了几天发现本来是可溶性蛋白的溶液居然有了沉淀,郁闷坏了!不知道液氮冷冻后放在-80怎么样呢?
5楼2010-08-31 09:54:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanghr595

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by sqhnsd at 2010-08-30 19:35:35:

基本原则:蛋白浓度应该1mg/ml以上,可以加入30%左右的甘油放入-20进行保存,如果只是一周左右的时间,4度一般也是可以的。

谢谢了!
6楼2010-08-31 09:55:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laren_

铜虫 (初入文坛)

7楼2010-08-31 10:11:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梅闲寒笑

金虫 (正式写手)

冻干,,低温保存,,
水墨丹青
8楼2010-08-31 15:20:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)

菌体冻在-20度可以保存很久的
9楼2010-08-31 15:41:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sutao1979

木虫 (著名写手)

小木虫10年groupleader

甘油,低温-80冻存
会当凌绝顶,一览众山小
10楼2010-08-31 15:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wanghr595 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 283求调剂 +7 小楼。 2026-03-12 10/500 2026-03-16 09:07 by QJ_River
[考研] 一志愿985,本科211,0817化学工程与技术319求调剂 +4 Liwangman 2026-03-15 4/200 2026-03-16 08:01 by wang_dand
[考研] 化学工程321分求调剂 +6 大米饭! 2026-03-15 6/300 2026-03-16 07:58 by wang_dand
[考研] 材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐 +6 Ncdx123456 2026-03-13 7/350 2026-03-16 07:44 by L135790
[考研] 材料工程专硕274一志愿211求调剂 +5 薛云鹏 2026-03-15 5/250 2026-03-15 20:38 by Logic2024
[考研] 274求调剂 +4 时间点 2026-03-13 4/200 2026-03-15 15:29 by Rambo13
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 求调剂 +6 yfihxh 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:18 by JourneyLucky
[考研] 环境调剂 +6 晓看天暮看云 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:16 by JourneyLucky
[考研] 考研材料与化工,求调剂 +8 戏精丹丹丹 2026-03-09 8/400 2026-03-14 01:14 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:30 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +8 zchqwer 2026-03-10 8/400 2026-03-14 00:01 by JourneyLucky
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 085600调剂 +5 漾漾123sun 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:06 by 星空星月
[考研] 26调剂/材料科学与工程/总分295/求收留 +9 2026调剂侠 2026-03-12 9/450 2026-03-13 20:46 by 18595523086
[考研] 302求调剂 +6 负心者当诛 2026-03-11 6/300 2026-03-13 16:11 by JourneyLucky
[考研] 材料调剂,307分 +13 张泳铭1 2026-03-09 17/850 2026-03-13 11:09 by 薛云鹏
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 270求调剂 085600材料与化工专硕 +3 YXCT 2026-03-11 3/150 2026-03-13 10:13 by houyaoxu
[考研] 化工0817调剂 +8 灿若星晨 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:44 by 星空星月
信息提示
请填处理意见