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chunmeiyang

银虫 (正式写手)

[求助] 甘油保护蛋白?

我们在纯化蛋白的buffer中有时会加入甘油,据说甘油对蛋白有保护作用,请问大家,甘油是如何保护蛋白的,原理是什么?
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w.king124

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖


adslye(金币+1): 鼓励交流~ 2011-10-06 22:13:30
会不会是减少机械剪切力呢
2楼2011-10-06 19:03:42
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angusqing

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
adslye(金币+3): 不错的分析,要是有参考资料加以完善将是EPI。鼓励新虫~~ 2011-10-06 22:14:28
chunmeiyang(金币+2): 2011-10-06 22:23:49
我不能说确定的什么因素在里边,分析一下吧
首先蛋白质被破坏的因素:重金属、酸、碱、高温、低温
在buffer中应用,对于前三条的要求应该比较多一些,而甘油的特性水溶液(1→10)显中性反应,主要起到稳定作用,且重金属含量不超过万分之二,
希望这些资料对你有帮助
木秀于林而风必摧之
3楼2011-10-06 19:27:39
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
adslye(金币+3): 这个点很对,鼓励交流~ 2011-10-06 22:15:10
chunmeiyang(金币+1): 2011-10-06 22:23:54
我补充一下吧,甘油在-20度时是不会凝固的,而蛋白一般是不稳定的,需要低温保存,温度越低,保存的时间久越长,而反复冻融会使蛋白质结构被破话。
风雪夜归人
4楼2011-10-06 21:30:32
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youngker918

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

adslye(BioEPI+1): 鼓励 2011-10-08 19:32:59
chunmeiyang(金币+1): 2011-10-09 08:48:01
首先,甘油可以降低体系的极性,体系的极性降低了,有助于蛋白结构稳定;第二,甘油可以降低体系的凝固点,这样利于蛋白在低温下保存,如果不加甘油的话,蛋白反复冻融数次就会失活,甚至变性
天才就怕不够天才,坏又不够坏,天天都想离开,却不知何处才能换骨脱胎
5楼2011-10-07 20:17:16
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yuguanggui

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

甘油还具有保水作用
yu
6楼2011-10-17 13:01:49
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lhczj

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

chunmeiyang(金币+1): 2011-10-19 18:17:46
甘油确实具有保护蛋白的功能,但大部分是在目的蛋白不稳定或者是冻干及其它制剂中用到,如果蛋白质稳定的话不建议加,因为甘油黏度较大,会增加层析时溶液黏度故而增加层析时系统的压力,同样能够起到保护作用的保护剂还有很多,吐温20、一些氨基酸等等,如果楼主的蛋白质不稳定可以试试。
7楼2011-10-17 15:39:58
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chengrujin

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2207211楼: Originally posted by wqj1988926 at 2011-10-06 21:30:32
我补充一下吧,甘油在-20度时是不会凝固的,而蛋白一般是不稳定的,需要低温保存,温度越低,保存的时间久越长,而反复冻融会使蛋白质结构被破话。

甘油的凝固点是20度左右,切勿误导人
8楼2012-09-22 13:08:46
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

用事实说话,我们实验室的甘油,冬天我也没看它凝固呀,(我们实验室在苏州)
风雪夜归人
9楼2012-09-22 16:35:57
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欧阳-90

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by chengrujin at 2012-09-22 13:08:46
甘油的凝固点是20度左右,切勿误导人...

20度凝固?不会吧。。。。
10楼2013-06-27 12:14:12
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