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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白纯化必须加20%甘油才有活性
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evelyn0606

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化必须加20%甘油才有活性

我的蛋白是一个37kDa的酶，一般先是过Ni柱，然后离子柱。整个过程中都必须要加20%的甘油才会有活性，否则活性会下降至少10倍。如果之前不加入甘油，再补加的话，还是没有活性。如果完整的纯化步骤结束，除去甘油，却不会影响活性。虽然能得到比较纯的蛋白，可是甘油对结晶影响很大，不知道还有什么别的试剂可以尝试代替甘油的。都什么试剂可以帮助提高蛋白活性呢
希望大家多多帮助啊
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1楼 2011-08-25 01:31:17
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
lstt09nk(金币+1): 感谢分享经验~~ 2011-08-25 08:48:41
蔗糖
tween
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2楼2011-08-25 08:20:19
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-08-25 09:06:08
二甲基亚砜 提高表面活性
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真相是最大的奢侈品
3楼2011-08-25 09:01:37
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
引用回帖:
3楼: Originally posted by wanhscn at 2011-08-25 09:01:37:
二甲基亚砜 提高表面活性

也可以与甘油合在一起用
但二甲基亚砜对人体有毒性
赞一下 回复此楼
真相是最大的奢侈品
4楼2011-08-25 09:15:47
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流~祝顺利！ 2011-08-25 16:51:12
海藻糖，蔗糖，乳糖！
赞一下(1人) 回复此楼
I am not a hero , but I served with heroes！
5楼2011-08-25 10:18:53
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ERIC20081938

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流， 2011-08-26 18:53:00
甘露糖，明胶或PEG400
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Flytothesky```
6楼2011-08-26 16:37:08
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blackrose8089
引用回帖:
6楼: Originally posted by ERIC20081938 at 2011-08-26 16:37:08:
甘露糖，明胶或PEG400

7楼2011-08-26 17:21:40
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lhczj

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢推荐 2011-08-27 10:46:19
还有一些氨基酸对维持蛋白质稳定有很大的保护作用，具体氨基酸你可以尝试下，毕竟对蛋白稳定的氨基酸不多，做个试验比较下
赞一下(2人) 回复此楼
8楼2011-08-26 22:38:04
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evelyn0606

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by lhczj at 2011-08-26 22:38:04:
还有一些氨基酸对维持蛋白质稳定有很大的保护作用，具体氨基酸你可以尝试下，毕竟对蛋白稳定的氨基酸不多，做个试验比较下

一般都多少浓度啊
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-09-01 23:31:14
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