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evelyn0606

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化必须加20%甘油才有活性

我的蛋白是一个37kDa的酶,一般先是过Ni柱,然后离子柱。整个过程中都必须要加20%的甘油才会有活性,否则活性会下降至少10倍。如果之前不加入甘油,再补加的话,还是没有活性。如果完整的纯化步骤结束,除去甘油,却不会影响活性。虽然能得到比较纯的蛋白,可是甘油对结晶影响很大,不知道还有什么别的试剂可以尝试代替甘油的。都什么试剂可以帮助提高蛋白活性呢
希望大家多多帮助啊
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evelyn0606

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by lhczj at 2011-08-26 22:38:04:
还有一些氨基酸对维持蛋白质稳定有很大的保护作用,具体氨基酸你可以尝试下,毕竟对蛋白稳定的氨基酸不多,做个试验比较下

一般都多少浓度啊
9楼2011-09-01 23:31:14
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-08-25 09:06:08
二甲基亚砜 提高表面活性
真相是最大的奢侈品
3楼2011-08-25 09:01:37
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

引用回帖:
3楼: Originally posted by wanhscn at 2011-08-25 09:01:37:
二甲基亚砜 提高表面活性

也可以与甘油合在一起用
但二甲基亚砜对人体有毒性
真相是最大的奢侈品
4楼2011-08-25 09:15:47
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流~祝顺利! 2011-08-25 16:51:12
海藻糖,蔗糖,乳糖!
I am not a hero , but I served with heroes!
5楼2011-08-25 10:18:53
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