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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白质多聚体的形成与pH变化有什么关系呢？
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cindererra

银虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质多聚体的形成与pH变化有什么关系呢？

各位好，我现在实验中遇到一个问题。所纯化的蛋白，在低pH条件下极易形成多聚体，而把pH升高到中性之后，一些多聚体又可以恢复到单体形式。请大家来帮我分析一下，这是什么原因呢？蛋白分子之间是什么作用力形成的多聚体呢？
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1楼 2011-10-20 21:06:37
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sspxiaoji

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

cindererra(金币+2): 2011-10-21 22:10:54
silicare(BioEPI+1): 2011-10-25 18:23:29
这个问题很复杂，聚合物的具体机理现在也还没有搞清楚（其实生物很多东西的机理都还不清楚）。很明显聚合物和PH有关，当然还和其他如缓冲液类型、缓冲液中的其他试剂、蛋白质浓度、处理过程（如纯化、超滤等）、温度、冻融情况等等相关。
总之，要具体蛋白具体分析。很多聚合是没有办法避免的。只能尽量预防，通常我们会加一些保护剂，如SDS/变性剂/甘油/EDTA/糖/氨基酸等
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2楼2011-10-21 14:57:57
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月月大可

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

我的蛋白曾经高度聚合，后来加入ATP就解聚了，应为它是ATP水解蛋白。这就在提示加入底物或者等稳定剂，帮助蛋白变到更加稳定的构象有利于解聚。
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3楼2011-10-21 16:56:56
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zlu520

至尊木虫 (职业作家)

限制人

【答案】应助回帖

PH影响蛋白质的化学键和氢键之间的结合。
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无完人！
4楼2011-10-21 17:25:15
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zhen_fang

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

pH影响酶之间各种氢键的链接，酸性条件下有利于一些氢键的合成，能促进蛋白的结合，、、上面有人提出加入一些甘油或氨基酸真的可以尝试下
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5楼2011-10-21 17:51:19
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cindererra

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sspxiaoji at 2011-10-21 14:57:57:
这个问题很复杂，聚合物的具体机理现在也还没有搞清楚（其实生物很多东西的机理都还不清楚）。很明显聚合物和PH有关，当然还和其他如缓冲液类型、缓冲液中的其他试剂、蛋白质浓度、处理过程（如纯化、超滤等）、温 ...

主要是低pH孵育是纯化过程中不可缺少的一步，而这个蛋白又对pH如此敏感，我们就想推论一下这个到底是什么原因，在实验过程中能不能避免多聚体的产生
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6楼2011-10-21 22:14:48
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sspxiaoji

银虫 (正式写手)
★
silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-10-25 18:22:50
引用回帖:
6楼: Originally posted by cindererra at 2011-10-21 22:14:48:
主要是低pH孵育是纯化过程中不可缺少的一步，而这个蛋白又对pH如此敏感，我们就想推论一下这个到底是什么原因，在实验过程中能不能避免多聚体的产生

你用的是什么纯化方法，为什么一定要低PH呢？很多纯化填料可以选择的
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7楼2011-10-25 08:50:05
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落满夏天

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare: 金币+3, 谢谢参与 2013-08-21 17:47:25
silicare: 应助指数+1 2013-08-21 17:47:31
多聚体形成有很多原因，氧化或者疏水都有可能，和浓度也有关系。当然PH也有直接关系。选择合适的Ph有必要，建议适当注意下浓度！
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星星之火，可以燎原
8楼2013-08-21 17:27:03
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