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甘油保护蛋白?
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chunmeiyang
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甘油保护蛋白?
我们在纯化蛋白的buffer中有时会加入甘油,据说甘油对蛋白有保护作用,请问大家,甘油是如何保护蛋白的,原理是什么?
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1楼
2011-10-06 15:32:58
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w.king124
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★
adslye(金币+1): 鼓励交流~ 2011-10-06 22:13:30
会不会是减少机械剪切力呢
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2011-10-06 19:03:42
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angusqing
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
adslye(金币+3): 不错的分析,要是有参考资料加以完善将是EPI。鼓励新虫~~ 2011-10-06 22:14:28
chunmeiyang(金币+2): 2011-10-06 22:23:49
我不能说确定的什么因素在里边,分析一下吧
首先蛋白质被破坏的因素:重金属、酸、碱、高温、低温
在buffer中应用,对于前三条的要求应该比较多一些,而甘油的特性水溶液(1→10)显中性反应,主要起到稳定作用,且重金属含量不超过万分之二,
希望这些资料对你有帮助
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木秀于林而风必摧之
3楼
2011-10-06 19:27:39
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wqj1988926
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
adslye(金币+3): 这个点很对,鼓励交流~ 2011-10-06 22:15:10
chunmeiyang(金币+1): 2011-10-06 22:23:54
我补充一下吧,甘油在-20度时是不会凝固的,而蛋白一般是不稳定的,需要低温保存,温度越低,保存的时间久越长,而反复冻融会使蛋白质结构被破话。
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风雪夜归人
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2011-10-06 21:30:32
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youngker918
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adslye(BioEPI+1): 鼓励 2011-10-08 19:32:59
chunmeiyang(金币+1): 2011-10-09 08:48:01
首先,甘油可以降低体系的极性,体系的极性降低了,有助于蛋白结构稳定;第二,甘油可以降低体系的凝固点,这样利于蛋白在低温下保存,如果不加甘油的话,蛋白反复冻融数次就会失活,甚至变性
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天才就怕不够天才,坏又不够坏,天天都想离开,却不知何处才能换骨脱胎
5楼
2011-10-07 20:17:16
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yuguanggui
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甘油还具有保水作用
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yu
6楼
2011-10-17 13:01:49
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lhczj
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chunmeiyang(金币+1): 2011-10-19 18:17:46
甘油确实具有保护蛋白的功能,但大部分是在目的蛋白不稳定或者是冻干及其它制剂中用到,如果蛋白质稳定的话不建议加,因为甘油黏度较大,会增加层析时溶液黏度故而增加层析时系统的压力,同样能够起到保护作用的保护剂还有很多,吐温20、一些氨基酸等等,如果楼主的蛋白质不稳定可以试试。
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7楼
2011-10-17 15:39:58
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chengrujin
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2207211楼
:
Originally posted by
wqj1988926
at 2011-10-06 21:30:32
我补充一下吧,甘油在-20度时是不会凝固的,而蛋白一般是不稳定的,需要低温保存,温度越低,保存的时间久越长,而反复冻融会使蛋白质结构被破话。
甘油的凝固点是20度左右,切勿误导人
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8楼
2012-09-22 13:08:46
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wqj1988926
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用事实说话,我们实验室的甘油,冬天我也没看它凝固呀,(我们实验室在苏州)
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风雪夜归人
9楼
2012-09-22 16:35:57
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8楼
:
Originally posted by
chengrujin
at 2012-09-22 13:08:46
甘油的凝固点是20度左右,切勿误导人...
20度凝固?不会吧。。。。
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10楼
2013-06-27 12:14:12
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