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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 提取DNA的过程中如何有效的除去蛋白质
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提来米苏713

木虫 (小有名气)

[交流] 提取DNA的过程中如何有效的除去蛋白质

求高人指点，在提取DNA的过程中如何有效的除去蛋白质，我提取的总是含有杂质蛋白，苯酚抽提。
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1楼 2011-12-02 10:44:42
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回帖置顶 ( 共有1个 )

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
提来米苏713(金币+1): 有没有什么好的方法能尽量少吸到中层变性的蛋白吗？用异丙醇沉淀吗，放置时间久了会将其他杂质一起沉下去的，我们一般用70%的酒精洗涤…… 2011-12-02 19:54:51
提来米苏713(金币+4): 有没有什么好的方法能尽量少吸到中层变性的蛋白吗？用异丙醇沉淀吗，放置时间久了会将其他杂质一起沉下去的，我们一般用70%的酒精洗涤…… 2011-12-02 19:58:04
提来米苏713: 回帖置顶 2011-12-02 19:59:20
linyingjia(金币+3, BioEPI+1): 量不大的话可以试剂盒回收 2011-12-03 18:39:23
苯酚抽提完后吸上清时尽量不要吸到沉淀，再一个加完异丙醇醋酸钠后放一段时间，用墙头或牙签把DNA沉淀挑出来再用75%洗涤再挑到干净管里风干就好了，保证没蛋白污染。
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2楼2011-12-02 12:13:24
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
苯酚氯仿多抽提两次
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3楼2011-12-02 12:47:38
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fxgowen

金虫 (小有名气)
用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA
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4楼2011-12-02 12:48:10
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c3024034

银虫 (正式写手)
酚氯仿抽提就可以去掉绝大多数蛋白
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5楼2011-12-02 16:16:22
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qingyuansw20

金虫 (小有名气)
1.先用苯酚抽提两次。2.用氯仿/异戊醇抽提两次。多次离心后中层无白色沉淀为止。
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6楼2011-12-02 16:44:01
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
用试剂盒吧   蛋白 很少
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7楼2011-12-03 18:36:29
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
可以把枪头剪去一块这样吸取上清时就会容易许多，并减少吸入蛋白的几率，吸取的体积不要太大。挑DNA团用异丙醇跟酒精效果差不多，下一步酒精洗涤不过是让DNA更纯一些。挑的DNA做后续实验质量相当好。
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8楼2011-12-03 21:57:51
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