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在DNA提取过程中遇到了困惑，希望朋友们可以解答一下,提DNA 的高手请进！！！
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在DNA提取过程中遇到了困惑，希望朋友们可以解答一下！！！ 提取对象为：植物核果的去核干燥果实 方法：CTAB法及SDS法。 药材数量：4g，大量粗提取。 在提取的过程中到没有什么异常出现，但最后一步用乙醇或异丙醇沉淀时，出现了大量胶状沉淀,按常规会判断为多糖，但在电泳后发现板孔附近并没有多糖的亮点，同时DNA的条带也是一点都没有，这个实验我试了很多方法，CTAB法，SDS法，大量提取，微量提取。也参考文献试了很多改良的方法，都没有得到DNA的条带。请问各位有什么高见？ 附上照片，用5ml及1.5ml离心管做。 此图分别为用醇沉淀瞬间出现的大量胶状沉淀。 离心沉淀。 用75醇洗涤后转入1.5 离心管。 电泳示意图。 |
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 【分子生物】EPI帖 |
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【答案】应助回帖
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amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-20 20:32:46
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-20 20:32:46
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你胶孔中很干净，说明抽提的很干净~~ 这一方面我也不是很懂，我只是研一而已~~ 我有几个想法，你可以考虑一下，我不是这方面的专家，只能算热心了~~呵呵~~不知道能不能帮上忙啊~~ 1，显然你提DNA的样品差别太大了，叶子和果实与干果差别有点大把，干果中水分含的很少，如果再按照原先的方法在处理上是不是应该改进一下？ 2，CTAB在65℃水浴4个小时，有点长把~~~基因组会不会降解呢？我这边是水浴时间不能太长，太长了基因组会降解。 3，继续查查有没有做这方面的文献吧~~~  加油~~  |
5楼2011-07-20 20:30:24
9楼2011-07-30 22:30:13
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西瓜(金币+4): 鼓励交流 2011-07-20 16:27:57
西瓜(金币+4): 鼓励交流 2011-07-20 16:27:57
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2楼2011-07-20 11:18:35
3楼2011-07-20 16:02:04
4楼2011-07-20 16:06:25
6楼2011-07-20 22:13:01
7楼2011-07-21 09:14:49
8楼2011-07-23 16:17:04
10楼2011-08-01 16:10:31