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@无花棉@

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】高盐低PH法提取种子DNA的原理

求原理,多谢!!
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lvbeike

木虫 (正式写手)


★ ★
看天(金币+2): 鼓励交流 2011-03-31 22:21:28
@无花棉@(金币+2): 2011-03-31 22:45:07
利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来
2楼2011-03-31 22:11:24
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@无花棉@

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by lvbeike at 2011-03-31 22:11:24:
利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于 ...

谢谢!你说的好像是在碱液中提取是吗?我不明白低PH的作用。。。
3楼2011-03-31 22:47:19
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lvbeike

木虫 (正式写手)


该 法 中 所用的提纯试剂仅为无机盐和异丙醇。通常采用的无机盐为醋酸钾,低pH的醋酸钾是有效的蛋白质沉淀剂。与一般氯仿一异丙醇反复抽提去除蛋白质的操作相比该法操作更方便省时,所需样品量少,适用于
濒危植物DNA的提取
4楼2011-03-31 23:07:29
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lvbeike

木虫 (正式写手)


不好意思  第一个是搜的 可以看发明这个方法的人的文献
Isolation of plant DNA:A fast,inexpensive,and reliable method    1992
5楼2011-03-31 23:18:07
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lvbeike

木虫 (正式写手)


@无花棉@(金币+5): 非常感谢,文献看过,只是具体的试剂作用不是很确定。我再仔细看看吧。辛苦了!! 2011-03-31 23:55:10
给你下了篇文献 一看就很恨恨明白了
http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=10916092laty8jpwtdpek3qh
6楼2011-03-31 23:31:54
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sunbio

禁言 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

7楼2011-04-01 09:44:26
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Shonna_Do

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
6楼: Originally posted by lvbeike at 2011-03-31 23:31:54
给你下了篇文献 一看就很恨恨明白了
http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=10916092laty8jpwtdpek3qh

怎么是非法参数。。
9楼2014-09-21 13:23:30
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yangxy04

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你说的应该是柱法或者磁珠法提取DNA吧?  这两种方法主要是利用在高盐低Ph条件下,离心柱或磁珠上的硅胶膜可以特异性的结合DNA,从而将其与其它杂质分离开来。
10楼2014-11-24 16:54:38
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2011-04-02 10:33   回复  
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