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[交流]
【求助/交流】有没有人做过用水煮法提取DNA的啊，望赐教 已有19人参与
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本人提细菌DNA基因组，由于对DNA纯度的要求不高，故想通过经济简便的方法提取（之前用试剂盒提，但比较贵），但经过网上找的水煮法流程试验了两次，都没成功（跑电泳都没跑出来），不知道这个方法到底可行不可行。。。 我是这么做的：菌液离心后去掉清液，EP管底部有菌体，加灭菌ddH2O（600微升左右吧）,然后沸水浴蒸煮10分钟，再离心，取上清液。。。。理论上DNA就应该溶于水中，但结果。。。悲剧啊。。望赐教~~最近导师催的紧，望各位虫友帮帮忙 |
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4楼2010-04-26 21:49:27
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Science298
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3楼2010-04-26 21:35:20
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1949stone(金币-2):有延迟 只加一个金币 抱歉 2010-04-27 08:53
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lstt09nk(金币+4):网络问题，把金币补加回来，望虫友谅解~~ 2010-04-29 15:49
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lstt09nk(金币+4):网络问题，把金币补加回来，望虫友谅解~~ 2010-04-29 15:49
| 你的菌是阳性菌还是阴性菌，一般阳性菌水煮效果就不好 |
6楼2010-04-27 08:51:16
yidaqunyan
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7楼2010-04-27 09:22:14
j2
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8楼2010-04-27 15:30:56
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lstt09nk: 2010-04-29 15:49
lstt09nk(金币+1):热心虫友~~ 2010-04-29 15:50
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lstt09nk(金币+1):热心虫友~~ 2010-04-29 15:50
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关于细菌DNA的提取，最好还是用反复煮沸和冻融法最好，单纯的煮沸效果不佳。具体方法是：将菌体收集加无菌水后，先用液氮冷冻（一定要冻实），然后放到沸水浴中煮沸3-5分钟，如此反复三次，再进行离心和后续提取DNA的操作。 我这里有成套的方法，我们实验室已经用得很成熟了，如果你需要可以联系我。 gaiyf@yahoo.cn |
9楼2010-04-27 16:25:41
10楼2010-04-27 17:18:25
