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紫琳

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助】【急】请问有谁做过细胞核STR分型检测和线粒体DNA测序？急求详细方法！

急求：细胞核STR分型检测和线粒体DNA测序的实验方法！

希望有做过的虫虫们不吝赐教！关于实验的方法、细节、所要用到的仪器、注意事项等。

感激不尽！
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1楼 2011-04-07 09:25:27
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赵凯

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
紫琳(金币+5): 2011-04-08 11:06:12
紫琳(金币+5): 2011-04-08 11:18:44
这是我每天的工作，先简单讲讲，详细的慢慢交流吧。
细胞核STR分型：首先是裂解细胞提取核酸，方法常用的有CHELEX-100法，磁珠法等；然后将提取好的核酸进行PCR扩增，当然要用到成品化的试剂，国产和进口的都有，需要扩增仪；最后用自动荧光测序仪电泳分析。
线粒体测序步骤差不多，但俺没做过，需要的话我可以帮你问问。
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2楼2011-04-07 22:57:35
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紫琳

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 赵凯 at 2011-04-07 22:57:35:
这是我每天的工作，先简单讲讲，详细的慢慢交流吧。
细胞核STR分型：首先是裂解细胞提取核酸，方法常用的有CHELEX-100法，磁珠法等；然后将提取好的核酸进行PCR扩增，当然要用到成品化的试剂，国产和进口的都有， ...

请问：检测及鉴定都要用到哪些仪器？ 我怎么听说有用毛细管电泳的？

另外请帮我问下有谁做过线粒体DNA测序的吧。非常感谢！
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3楼2011-04-08 11:11:21
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紫琳

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 赵凯 at 2011-04-07 22:57:35:
这是我每天的工作，先简单讲讲，详细的慢慢交流吧。
细胞核STR分型：首先是裂解细胞提取核酸，方法常用的有CHELEX-100法，磁珠法等；然后将提取好的核酸进行PCR扩增，当然要用到成品化的试剂，国产和进口的都有， ...

请问下你有直接从事DNA鉴定工作的朋友吗？

能否把你做的细胞核STR分型的实验方法及分析鉴定的步骤发我一份阿？word或者pdf文献都行。

感激不尽！
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4楼2011-04-08 11:18:17
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liugs

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
5楼2011-04-08 14:31:56
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liugs

禁虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
本帖内容被屏蔽
6楼2011-04-08 14:33:33
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赵凯

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
把你的邮箱发给我，下周一发给你。
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7楼2011-04-08 22:52:34
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赵凯

铜虫 (小有名气)
我实验室扩增使用的是AB9700，测序用的是AB3130XL和3100两种荧光遗传分析仪。我们是法医DNA实验室，所以每天的工作就是做STR分型。
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8楼2011-04-08 22:57:29
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紫琳

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 赵凯 at 2011-04-08 22:57:29:
我实验室扩增使用的是AB9700，测序用的是AB3130XL和3100两种荧光遗传分析仪。我们是法医DNA实验室，所以每天的工作就是做STR分型。

法医DNA实验室做线粒体DNA测序的更多吧？血液、毛发、组织等。

我把我的邮箱用短消息发给你了。非常感谢你！
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9楼2011-04-09 10:11:49
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赵凯

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
现在全国范围内的法医实验室做线粒体测序的基本绝迹，包括公安部的DNA实验室，因为一是线粒体是母系遗传，对实际案件没太大作用；二是相对于做STR基因分型线粒体测序太容易污染；三是目前STR基因分型的检出率较当年大幅度提高，所以对于公安系统要求个体识别和亲子鉴定的来讲，做STR最适合了。
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10楼2011-04-09 23:35:14
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紫琳

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by 赵凯 at 2011-04-09 23:35:14:
现在全国范围内的法医实验室做线粒体测序的基本绝迹，包括公安部的DNA实验室，因为一是线粒体是母系遗传，对实际案件没太大作用；二是相对于做STR基因分型线粒体测序太容易污染；三是目前STR基因分型的检出率较当 ...

相当专业！

非常感谢！
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11楼2011-04-10 08:34:03
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99辛子

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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2楼: Originally posted by 赵凯 at 2011-04-07 22:57:35
这是我每天的工作，先简单讲讲，详细的慢慢交流吧。
细胞核STR分型：首先是裂解细胞提取核酸，方法常用的有CHELEX-100法，磁珠法等；然后将提取好的核酸进行PCR扩增，当然要用到成品化的试剂，国产和进口的都有，需 ...

线粒体DNA测序的价格贵吗？
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12楼2015-01-04 13:56:34
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yangjingjing

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 赵凯 at 2011-04-07 22:57:35
这是我每天的工作，先简单讲讲，详细的慢慢交流吧。
细胞核STR分型：首先是裂解细胞提取核酸，方法常用的有CHELEX-100法，磁珠法等；然后将提取好的核酸进行PCR扩增，当然要用到成品化的试剂，国产和进口的都有，需 ...

同求，有木有手册或者网站什么的，新手问题多啊，谢谢！
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13楼2015-04-27 08:54:08
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yangjingjing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 赵凯 at 2011-04-08 22:52:34
把你的邮箱发给我，下周一发给你。

同求，可以发我一份实验方法及分析鉴定的步骤吗？邮箱是1070627778@qq.com，万分感谢
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14楼2015-04-27 08:55:36
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StemCell006

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以参阅这篇文章：http://blog.sina.com.cn/s/blog_1479e3ad00102w62a.html
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15楼2015-11-26 12:32:43
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StemCell006

新虫 (初入文坛)
可以参考这篇文章：http://blog.sina.com.cn/s/blog_1479e3ad00102w62a.html
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16楼2015-11-26 12:34:03
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