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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 微生物、发酵 » 有谁做过用提取DNA的方法计数粪便中的菌，能不能简单给我介绍一下步骤
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jayzhao520

木虫 (正式写手)

[求助] 有谁做过用提取DNA的方法计数粪便中的菌，能不能简单给我介绍一下步骤

rt，就讲一下大致的步骤就行
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1楼 2012-02-15 07:53:31
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
jayzhao520(金币+2): ★有帮助 2012-02-16 08:10:39
我没做过，但是大概思路我有点，1.粪便中细菌分离纯化，分别破壁提取总MRNA，RT-PCR制作DNA探针，DNA探针需要根据不同细菌的特异性核酸片断进行设计。
2.PCR DNA探针，涂布在基材上，检测活性。
3.粪便处理，检测即可。
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2楼2012-02-15 12:44:49
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jayzhao520

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 留级生2005 at 2012-02-15 12:44:49:
我没做过，但是大概思路我有点，1.粪便中细菌分离纯化，分别破壁提取总MRNA，RT-PCR制作DNA探针，DNA探针需要根据不同细菌的特异性核酸片断进行设计。
2.PCR DNA探针，涂布在基材上，检测活性。
3.粪便处理，检 ...

第1步是将细菌与非细菌粪便杂志分离的意思吗？
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3楼2012-02-15 19:14:58
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

jayzhao520(金币+2): 2012-02-16 08:10:57
粪便中的细菌太多，只能粗分类，粪便中没有无菌的。细菌分离主要目的是要获得特异性DNA探针。
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4楼2012-02-15 23:06:41
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jayzhao520

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 留级生2005 at 2012-02-15 23:06:41:
粪便中的细菌太多，只能粗分类，粪便中没有无菌的。细菌分离主要目的是要获得特异性DNA探针。

你的意思是要先用粪便里的菌做成探针，然后再用这些探针定量粪便里的菌？
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5楼2012-02-16 08:12:10
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留级生2005

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

菌与DNA区别很大哦！！
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6楼2012-02-16 11:24:52
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jayzhao520

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 留级生2005 at 2012-02-16 11:24:52:
菌与DNA区别很大哦！！

嗯，我的意思就是dna的意思
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国合通用（青岛）测试评价有限公司，国家新材料测试评价平台-青岛实验室。
7楼2012-02-16 12:20:47
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