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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 放线菌基因组DNA提取后，用TE不溶！！？
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

[求助] 放线菌基因组DNA提取后，用TE不溶！！？

如题，用的方法和以前一样，以前提取后，加入TE立刻就溶，现在怎么都不容了，求原因！！！！
我配置的溶液（10%sds，TE，蛋白酶K-20度保存）是两个月前的会不会有影响？
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1楼2011-07-05 15:50:04
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★
蓝月望宁(金币+1): 2011-07-05 16:38:07
1949stone(金币+1): dna的问题吧 就算变质也还还是可以溶解的 2011-07-05 19:44:02
首先要排除TE变质的可能性；
其次就是你最后提取出来的基因组DNA是否杂质太多。。。。
实在不行换其它的可以溶解DNA的试剂溶解试试看，如果还是不能溶解，那么肯定是杂质太多了。
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2楼2011-07-05 16:31:16
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-07-05 09:31:16:
首先要排除TE变质的可能性；
其次就是你最后提取出来的基因组DNA是否杂质太多。。。。
实在不行换其它的可以溶解DNA的试剂溶解试试看，如果还是不能溶解，那么肯定是杂质太多了。

请问下TE如何变质的？就算变质了也是可以溶解DNA的呀，TE什么条件变质？谢谢
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3楼2011-07-05 16:37:38
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
dhd997(金币+1): 这种溶液不会损坏电极吧 2011-07-09 18:13:30
测下pH，TE是弱碱性的。
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4楼2011-07-05 16:46:32
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txy8469393

木虫 (小有名气)

拿着扫把的研究僧
★
1949stone(金币+1): 同意 2011-07-05 19:44:26
多用苯酚除除蛋白，不溶解肯定是杂质，估计是蛋白。
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找我请打110,你别看我拿着扫把,其实我是弹吉他的!
5楼2011-07-05 17:49:56
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by txy8469393 at 2011-07-05 10:49:56:
多用苯酚除除蛋白，不溶解肯定是杂质，估计是蛋白。

谢谢！！
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6楼2011-07-06 07:46:35
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)
★
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-07-06 21:18:54
直接用超纯水试试
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科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
7楼2011-07-06 21:09:27
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doriscc

金虫 (初入文坛)
★
dhd997(金币+1): 有这个可能 2011-07-09 18:13:06
应该是蛋白没有除干净
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8楼2011-07-09 17:31:40
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ureyguo

木虫 (正式写手)
蛋白没提干净吧！再试试
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9楼2011-07-09 22:52:58
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)
★ ★
dhd997(金币+2): 非常欢迎跟帖诉说最新进展。maker跑不好，可以考虑电压，或者缓冲液是否有问题。见过类似帖子，可以搜一下 2011-07-10 17:39:43
问题已解决，大家说的没错，蛋白杂志太多。
另外再问大家。有时候DNA电泳时，MARker都跑的不好，是什么原因？补充：不是凝胶的问题。
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10楼2011-07-10 09:42:15
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