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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 蓝月望宁 at 2011-07-10 02:42:15:
问题已解决,大家说的没错,蛋白杂志太多。
另外再问大家。有时候DNA电泳时,MARker都跑的不好,是什么原因?补充:不是凝胶的问题。

电压和缓冲液是没有问题的,因为我们那个电泳槽是公用的,其他人跑的都不错。我估计是marker本身的问题。但是这个怎么解决?换一个?
另外大家提细菌基因组DNA时用多大的电压?时间呢?
坚持,一秒钟,就离,成功,近一步!
11楼2011-07-12 07:36:03
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amose

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 鼓励热心交流,请看第十楼。 2011-07-12 19:26:04
是不是Marker太小了你用的是多少bp的啊,我提放线菌基因组跑胶是100v,35分钟左右,时间是要看你指示剂跑得情况,一般指示剂到倒数第二个线进行了
对了你提的是放线菌么?怎么进行细胞破碎的?
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
12楼2011-07-12 17:49:54
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 非常热心,鼓励之 2011-07-13 08:04:48
引用回帖:
Originally posted by amose at 2011-07-12 10:49:54:
是不是Marker太小了你用的是多少bp的啊,我提放线菌基因组跑胶是100v,35分钟左右,时间是要看你指示剂跑得情况,一般指示剂到倒数第二个线进行了
对了你提的是放线菌么?怎么进行细胞破碎的?

Marker为Lambda Mix Marker ,19.最大的48502kb。不是过小。
我的是阳性菌,用溶菌酶破壁。
你用的凝胶浓度为多少?
对基因组来说,分子片段较大,理论上应该是低电压,长时间的,你怎么用这么高的电压,这么短的时间?请问你电泳效果如何?可不可以传图上来?
坚持,一秒钟,就离,成功,近一步!
13楼2011-07-13 07:40:25
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

不好意思是48502bp
坚持,一秒钟,就离,成功,近一步!
14楼2011-07-13 08:07:08
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amose

银虫 (正式写手)

我所用的电压和时间是实验室里师兄教的,我们得到的条带只是为了检验下是否提出,一般就是在胶空附近有一亮条带!
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
15楼2011-07-14 11:04:25
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by amose at 2011-07-14 04:04:25:
我所用的电压和时间是实验室里师兄教的,我们得到的条带只是为了检验下是否提出,一般就是在胶空附近有一亮条带!

在胶空有一条亮带是什么意思?你指的是点样孔?
只是为了检验是否提出?这就是你提DNA的目的吗?
坚持,一秒钟,就离,成功,近一步!
16楼2011-07-14 13:05:37
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amose

银虫 (正式写手)

嗯是在点样孔附近,为了后面的扩16s
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
17楼2011-07-14 20:19:02
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bogaoedu

银虫 (初入文坛)

很可能是杂质太多,建议抽提一下,看看效果!
18楼2011-07-14 20:28:08
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liugangpk545

铜虫 (小有名气)

是不是电泳缓冲液的问题?   电泳槽里的缓冲液   最好一天一换
有一种缘,放手后成为风景。
19楼2011-12-06 16:26:12
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liugangpk545

铜虫 (小有名气)

DNA片段的大小与所需的电压没有关系,要用多少的电压与电泳槽两个电极的距离有关,理论上电压不应该超过5 v/cm,电泳的电压就是正负电极的距离*5v。但是好像超过了也没关系,但是也不能太大,还是在5v/cm以下好点。跑电泳的过程同时也是样品扩散的过程,电压太小,扩散就会多点,条带也不清晰。' _9 J7 \4 Z2 G( b
区分不同大小的片段取决于胶的浓度。

以上引用“ hndxws  “希望对你有所帮助
有一种缘,放手后成为风景。
20楼2011-12-06 16:45:20
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