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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

[求助] 放线菌基因组DNA提取后,用TE不溶!!?

如题,用的方法和以前一样,以前提取后,加入TE立刻就溶,现在怎么都不容了,求原因!!!!
我配置的溶液(10%sds,TE,蛋白酶K-20度保存)是两个月前的会不会有影响?
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 非常热心,鼓励之 2011-07-13 08:04:48
引用回帖:
Originally posted by amose at 2011-07-12 10:49:54:
是不是Marker太小了你用的是多少bp的啊,我提放线菌基因组跑胶是100v,35分钟左右,时间是要看你指示剂跑得情况,一般指示剂到倒数第二个线进行了
对了你提的是放线菌么?怎么进行细胞破碎的?

Marker为Lambda Mix Marker ,19.最大的48502kb。不是过小。
我的是阳性菌,用溶菌酶破壁。
你用的凝胶浓度为多少?
对基因组来说,分子片段较大,理论上应该是低电压,长时间的,你怎么用这么高的电压,这么短的时间?请问你电泳效果如何?可不可以传图上来?
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13楼2011-07-13 07:40:25
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖


蓝月望宁(金币+1): 2011-07-05 16:38:07
1949stone(金币+1): dna的问题吧 就算变质也还还是可以溶解的 2011-07-05 19:44:02
首先要排除TE变质的可能性;
其次就是你最后提取出来的基因组DNA是否杂质太多。。。。
实在不行换其它的可以溶解DNA的试剂溶解试试看,如果还是不能溶解,那么肯定是杂质太多了。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-07-05 16:31:16
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蓝月望宁

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-07-05 09:31:16:
首先要排除TE变质的可能性;
其次就是你最后提取出来的基因组DNA是否杂质太多。。。。
实在不行换其它的可以溶解DNA的试剂溶解试试看,如果还是不能溶解,那么肯定是杂质太多了。

请问下TE如何变质的?就算变质了也是可以溶解DNA的呀,TE什么条件变质?谢谢
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3楼2011-07-05 16:37:38
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)


dhd997(金币+1): 这种溶液不会损坏电极吧 2011-07-09 18:13:30
测下pH,TE是弱碱性的。
4楼2011-07-05 16:46:32
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