24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2686  |  回复: 20

蓝月望宁

金虫 (正式写手)

[求助] 放线菌基因组DNA提取后,用TE不溶!!?

如题,用的方法和以前一样,以前提取后,加入TE立刻就溶,现在怎么都不容了,求原因!!!!
我配置的溶液(10%sds,TE,蛋白酶K-20度保存)是两个月前的会不会有影响?
回复此楼
坚持,一秒钟,就离,成功,近一步!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖


蓝月望宁(金币+1): 2011-07-05 16:38:07
1949stone(金币+1): dna的问题吧 就算变质也还还是可以溶解的 2011-07-05 19:44:02
首先要排除TE变质的可能性;
其次就是你最后提取出来的基因组DNA是否杂质太多。。。。
实在不行换其它的可以溶解DNA的试剂溶解试试看,如果还是不能溶解,那么肯定是杂质太多了。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-07-05 16:31:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝月望宁

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-07-05 09:31:16:
首先要排除TE变质的可能性;
其次就是你最后提取出来的基因组DNA是否杂质太多。。。。
实在不行换其它的可以溶解DNA的试剂溶解试试看,如果还是不能溶解,那么肯定是杂质太多了。

请问下TE如何变质的?就算变质了也是可以溶解DNA的呀,TE什么条件变质?谢谢
坚持,一秒钟,就离,成功,近一步!
3楼2011-07-05 16:37:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)


dhd997(金币+1): 这种溶液不会损坏电极吧 2011-07-09 18:13:30
测下pH,TE是弱碱性的。
4楼2011-07-05 16:46:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

txy8469393

木虫 (小有名气)

拿着扫把的研究僧


1949stone(金币+1): 同意 2011-07-05 19:44:26
多用苯酚除除蛋白,不溶解肯定是杂质,估计是蛋白。
找我请打110,你别看我拿着扫把,其实我是弹吉他的!
5楼2011-07-05 17:49:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝月望宁

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by txy8469393 at 2011-07-05 10:49:56:
多用苯酚除除蛋白,不溶解肯定是杂质,估计是蛋白。

谢谢!!
坚持,一秒钟,就离,成功,近一步!
6楼2011-07-06 07:46:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dehong1573

至尊木虫 (正式写手)


西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-07-06 21:18:54
直接用超纯水试试
科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
7楼2011-07-06 21:09:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

doriscc

金虫 (初入文坛)


dhd997(金币+1): 有这个可能 2011-07-09 18:13:06
应该是蛋白没有除干净
8楼2011-07-09 17:31:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ureyguo

木虫 (正式写手)

蛋白没提干净吧!再试试
9楼2011-07-09 22:52:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝月望宁

金虫 (正式写手)

★ ★
dhd997(金币+2): 非常欢迎跟帖诉说最新进展。maker跑不好,可以考虑电压,或者缓冲液是否有问题。见过类似帖子,可以搜一下 2011-07-10 17:39:43
问题已解决,大家说的没错,蛋白杂志太多。
另外再问大家。有时候DNA电泳时,MARker都跑的不好,是什么原因?补充:不是凝胶的问题。
坚持,一秒钟,就离,成功,近一步!
10楼2011-07-10 09:42:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蓝月望宁 的主题更新
信息提示
请填处理意见