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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » CTAB提取细菌DNA
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匿名

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1楼 2011-07-17 15:38:06
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likewind_z

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励一下 2011-07-17 17:48:29
1949stone: 此为通用方法么？？？ 2011-07-17 22:08:05
酚仿抽提时可以加一点点EB，它结合到DNA上，可以使蛋白剥离，再抽第二次酚仿可以萃取出EB，不影响DNA
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2楼2011-07-17 15:42:17
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匿名

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3楼2011-07-17 16:48:06
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likewind_z

金虫 (小有名气)
不算通用吧，我只有蛋白很多的菌才用这一步，特别是需要大量高质量的DNA去做基因组测序
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4楼2011-07-18 08:55:22
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likewind_z

金虫 (小有名气)
加一点点哦，10ml加20-50ul就行了
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5楼2011-07-18 08:56:07
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bear0329

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 对 2011-07-18 12:47:50
开始的时候加点蛋白酶，还有吸的时候用小枪头多吸几次
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以马内利！
6楼2011-07-18 09:15:03
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tssy77

木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-07-19 08:03:27
baiyal2000(金币+2): 2011-07-23 12:53:45
我建议用大枪头，而且把头剪掉一块，因为大枪头相对吸力可能会小一些，这样就不会吸到中间层，其实你不吸到中间层，上清里也是会有些的，如果还有，就用酚氯仿再洗脱！这方法我一直在用，还可以！祝顺利！不过我一直不知中间白色物质除了蛋白还有些什么物质？
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平常心
7楼2011-07-18 20:49:00
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beautybanana

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

baiyal2000(金币+1): 2011-07-23 12:53:52
引用回帖:
Originally posted by baiyal2000 at 2011-07-17 15:38:06:
加入氯仿与异戊醇离心之后，两层之间存在大量的白色絮状物，严重的干扰吸取上清，只要吸取上清，枪头就会吸附白色絮状物，请问这该怎么解决？？

多来回摇几次，然后静置，分好层后，你沿着管壁慢慢往下吸，枪头贴着液面，边吸边往下移动枪头，动作缓慢点应该就能把上清吸好了~
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8楼2011-07-18 21:21:31
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主离心多久啊，是不是离心时间不够，可以适当多离一会
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科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
9楼2011-07-18 22:00:25
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cherrysyp

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

吸取是时候不要吸到底啊，留一厘米左右啊，嘿嘿
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10楼2011-07-18 22:47:56
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