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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：用紫外分光光度仪检测dna浓度 读数不稳定怎么解决啊
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匿名

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紫外荧光 核酸生物学实验经验

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1楼2012-03-29 15:34:47
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绝路书生

铜虫 (小有名气)
紫外分光光度计经常出现数据不稳，数据跳的情况，如果出现波动较大的数据时果断停止，再做已经没有意义了，先排除问题。首先，比色皿，比色皿在国外都是一次性的，我们实验室条件有限会重复利用，所以一定要检查比色皿是否洗净（可以让比色皿都装上水检测比色皿之间的误差），以及是不是用了不该用的比色皿，比如石英、塑料、玻璃等。其次，仪器，紫外分光光度计过一段时间才会稳定，一般半小时左右，而且紫外和可见有两个开关控制，要注意这一点，数据跳时也不妨关机再开试试或者用别人的仪器试试，这样就可以排除仪器的问题。最后，样品液的问题，包括缓冲液中是否有太多杂物（有，可以离心出去），是否浓度太大（仪器会显示overflow），有没有混匀（最好测之前用漩涡振荡器混匀一下），溶液有没有分层？总之，遇见问题要多角度分析再一个一个问题的排除。
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18楼2012-07-13 11:15:04
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超然渡陈

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是用紫外分光光度计还是用核酸蛋白测定仪测的？
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2楼2012-03-29 15:55:58
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jiaolichao: 金币+5, ★有帮助 2012-03-29 16:47:40
一般是用的PH-7.2的TRIS-HCL
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我就是我
3楼2012-03-29 16:17:14
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匿名

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4楼2012-03-29 16:25:20
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匿名

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5楼2012-03-29 16:25:42
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)
8.0的也行吧，一般用这两种，具体有什么区别我也不太清楚！
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我就是我
6楼2012-03-29 16:33:00
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匿名

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7楼2012-03-29 16:47:05
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
有的分光光度计需要预热一段时间才稳定，楼主可排除下是不是这个原因哦。
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8楼2012-03-29 17:43:10
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schkk

至尊木虫 (正式写手)
仪器稳定性要求较高，同时用水一定不准，最好用buffer
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9楼2012-03-29 22:02:49
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匿名

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10楼2012-03-30 08:37:59
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