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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 普通分光光度计、荧光分光光度计和荧光光谱仪的区别
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liuqvdanxin

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1楼 2011-08-20 09:32:25
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princefss

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西湖醉鱼(金币+1): 欢迎常来 2011-08-20 19:58:21
liuqvdanxin(金币+1): 谢谢，从你的专业角度分析了两者的区别，希望能一一回答上面的疑问 2011-08-22 11:45:40
普通分光光度计：利用单色仪或特殊光源提供的特定波长的单色光通过标样和被分析样品，比较两者的光强度来分析物质成分的光谱仪器。
紫外分光光度计测的是分子在紫外光区的吸收强度，荧光分光光度计测的是吸收光能量后处于激发态的分子发出的辐射（即分子荧光）。
首先紫外和AA属于吸收光谱类产品，荧光属发射光谱类产品。使用上，紫外原则上含共轭结构的都可以测，AA偏重于金属元素的测试，一般情况下荧光测试的精度高一些，但要有激发荧光的条件，所以测试使用于一些特殊的项目，选择产品时，建议你按国标或行业标准选择产品。
紫外和原子吸收虽然都是吸收光谱，但前者是分子吸收，后者是原子吸收；前者是宽带吸收，后者是锐线吸收；前者测定的是在紫外光区有吸收的物质，后者测的是金属元素的含量。分子荧光测定的是可以发出荧光的物质，通常有比较好的检出限。
两者的原理是不大一样，紫外是吸收光谱；荧光是发射光谱。
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好好生活，努力工作！
2楼2011-08-20 11:38:34
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liuqvdanxin

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3楼2011-09-13 13:57:11
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

liuqvdanxin(金币+9): 非常感谢 2011-09-13 21:53:26
1 普通分光光度计是什么分光光度计？一次只能测定一个波长位置样品的紫外吸收强度（常见721、722型）一般是300~700nm
2 普通分光光度计和荧光分光光度计有什么区别？前者是测定分子吸收光谱，后者是测定分子吸收光后，产生的发光光谱。
3 紫外分光光度计呢？紫外可见光谱仪可以一次测定200~800nm范围吸光强度，也就是样品吸收曲线。
4 吸光度和荧光强度有关系么？为什么测的方式差不多？吸光度物质在某一波长处的吸收强度，是特定的，和仪器设置关系不大；荧光强度 物质在发射光谱某一位置荧光峰强度，也可以用发射峰面积表示，他们的强度受仪器设置参数影响，是相对值!
5 荧光分光光度计和荧光光谱仪一样吗？测出来的东西（各项指标）含义一样么？
6 荧光分光光度计能测荧光强度和荧光光谱，那么荧光光谱仪可以么？5,6中的问题差不多，强制测定发射荧光光谱，后者测定某一发射波长荧光强度。
7 要测DNA的浓度用什么测？荧光光谱仪可以测么？
8 RNA的浓度呢？7,8问题 可以测，不太方便，受影响因素较多，加入染料的量，发光的线性范围染料与核酸结合强弱，仪器设置参数等。一般不用荧光光分光光度计测定浓度。
9 为什么我的空白对照用荧光光谱仪测出的荧光强度比扩增后测出的荧光强度还高？(反应都加入了SG染料，但对照没加引物)  实时定量pcr没有用过，是不是你的仪器条件不一致，还是原因，就不好说了！
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4楼2011-09-13 15:15:34
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liuqvdanxin

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5楼2011-12-15 19:14:47
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