应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 为什么提取的DNA总是降解？
421/5返回列表12345下一页
查看: 7001  |  回复: 41
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

永不后悔2838

铁虫 (小有名气)

[交流] 为什么提取的DNA总是降解？ 已有27人参与

各位大侠，为什么我提取的DNA总是降解呢？用的是传统的苯酚-氯仿抽提的方法，最后一步加入冰乙醇沉淀的时候能看到大量的絮状沉淀，TE溶解过夜，琼脂糖胶检测时条带却是这样(如图）。分光光度计检测浓度和纯度都正常。实验室几个人提取都是这样，不知道是什么原因，所用的试剂已经重新配过，还是这个结果。请问有没有遇到过类似情况的，这是什么原因，怎么解决呢？请大家指点帮助~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
时间是贼，偷走一切……
1楼 2011-08-18 14:25:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
注意你酚氯仿的PH值
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-08-18 14:27:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水泗晶

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你看见的大量絮状物也有可能是杂质的，你萃取了几遍？你DNA溶完后是不是没有及时放进冰箱？我看你有块胶跑的条带有些乱，你的电流没有控制好
赞一下(1人) 回复此楼
29楼2012-03-23 18:53:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leebiao

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的问题解决了吗，我也遇到相同问题了。
赞一下(1人) 回复此楼
39楼2014-11-24 10:39:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

永不后悔2838

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 永不后悔2838 at 2011-08-18 14:25:07:
各位大侠，为什么我提取的DNA总是降解呢？用的是传统的苯酚-氯仿抽提的方法，最后一步加入冰乙醇沉淀的时候能看到大量的絮状沉淀，TE溶解过夜，琼脂糖胶检测时条带却是这样(如图）。分光光度计检测浓度和纯度都正 ...

非常感谢，那个都是从公司买的，而且也换过不同的，结果还一样，请问还有别的可能吗？
赞一下 回复此楼
时间是贼，偷走一切……
3楼2011-08-18 17:38:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永不后悔2838

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by silicare at 2011-08-18 14:27:01:
注意你酚氯仿的PH值

非常感谢，那个都是从公司买的，而且也换过不同的，结果还一样，请问还有别的可能吗？
赞一下 回复此楼
时间是贼，偷走一切……
4楼2011-08-18 17:39:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
lstt09nk(金币+1): 感谢参与 2011-08-19 18:11:07
引用回帖:
4楼: Originally posted by 永不后悔2838 at 2011-08-18 17:39:01:
非常感谢，那个都是从公司买的，而且也换过不同的，结果还一样，请问还有别的可能吗？

PH是多少
回复此楼
5楼2011-08-18 18:08:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

adslye

银虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看天(金币+4): 鼓励回答 2011-08-18 23:50:56
gDNA降解无非两个原因：
1.细胞内DNA酶作用于gDNA，你的材料在放入提取液前没有在细胞破碎的情况下放久吧？
2.机械力作用：有很剧烈的长时间涡旋吗？或者之类的。但一般也不会有事。

另外，至于PH，水饱和酚（PH4）条件下，gDNA溶于有机相，应该提不出来。TRIS饱和酚，如果过期也是蛋白除不尽。我觉得应该不是酚的问题。

我看你第二张图最后一孔gDNA正常，没降解。是同同批次，同操作吗？如果是，说明操作失误。

我的解决方法是：不要再去想了（这个实验真的很难做出降解）。换一个方法，买一个kit，gDNA提取试剂盒很便宜的。
赞一下(3人) 回复此楼
6楼2011-08-18 19:14:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rioarsenal

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1楼: Originally posted by 永不后悔2838 at 2011-08-18 14:25:07:
各位大侠，为什么我提取的DNA总是降解呢？用的是传统的苯酚-氯仿抽提的方法，最后一步加入冰乙醇沉淀的时候能看到大量的絮状沉淀，TE溶解过夜，琼脂糖胶检测时条带却是这样(如图）。分光光度计检测浓度和纯度都正 ...

楼主提的什么材料，怎么粉碎的，是否加入了蛋白酶K来抑制内源性DNA酶？
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-08-18 21:52:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hqc87

铁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看天(金币+1): 鼓励交流 2011-08-18 23:51:05
一直用CTAB法提植物DNA，没出过问题
赞一下(3人) 回复此楼
8楼2011-08-18 22:50:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqj1988926

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我做过用ctab法提取，并且实验试剂都是自己配的，不过我没有进行DNA电泳，直接后续实验，结果也很好，楼主可以试着后续实验，看看效果。
赞一下(2人) 回复此楼
风雪夜归人
9楼2011-08-19 08:33:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

永不后悔2838

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by silicare at 2011-08-18 18:08:52:
PH是多少

没测过，我测测试试，谢谢建议~
赞一下 回复此楼
时间是贼，偷走一切……
10楼2011-08-19 08:48:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 永不后悔2838 的主题更新
421/5返回列表12345下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭