| 查看: 5703 | 回复: 41 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
为什么提取的DNA总是降解？已有27人参与
|
|||
各位大侠，为什么我提取的DNA总是降解呢？用的是传统的苯酚-氯仿抽提的方法，最后一步加入冰乙醇沉淀的时候能看到大量的絮状沉淀，TE溶解过夜，琼脂糖胶检测时条带却是这样(如图）。分光光度计检测浓度和纯度都正常。实验室几个人提取都是这样，不知道是什么原因，所用的试剂已经重新配过，还是这个结果。请问有没有遇到过类似情况的，这是什么原因，怎么解决呢？请大家指点帮助~  |
回复此楼» 猜你喜欢
真诚求助：手里的省社科项目结项要求主持人一篇中文核心，有什么渠道能发核心吗
已经有8人回复
-
寻求一种能扛住强氧化性腐蚀性的容器密封件
已经有5人回复
-
论文投稿，期刊推荐
已经有6人回复
-
请问哪里可以有青B申请的本子可以借鉴一下。
已经有4人回复
-
孩子确诊有中度注意力缺陷
已经有14人回复
-
请问下大家为什么这个铃木偶联几乎不反应呢
已经有5人回复
-
请问有评职称，把科研教学业绩算分排序的高校吗
已经有5人回复
-
2025冷门绝学什么时候出结果
已经有3人回复
-
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入
已经有4人回复
-
康复大学泰山学者周祺惠团队招收博士研究生
已经有6人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
小鼠肝脏基因组DNA提取大部分降解为300-500bp了
已经有11人回复- 提取RNA时，为何会有DNA条带，并且有且只有一条带？
已经有9人回复
- 为什么DNA提取总降解
已经有15人回复
- 【求助/交流】提取的DNA降解了？？
已经有16人回复
- 【求助/交流】氯化苄提取酵母DNA，DNA降解的厉害，求高人指点！！！
已经有4人回复
- 【求助/交流】提取的DNA纯度不好
已经有10人回复
- 【求助/交流】为什么内切酶总是切不开我的DNA
已经有14人回复
adslye
银虫 (正式写手)
- BioEPI: 10
- 应助: 6 (幼儿园)
- 贵宾: 0.244
- 金币: 364.9
- 散金: 766
- 红花: 6
- 帖子: 514
- 在线: 119.5小时
- 虫号: 845336
- 注册: 2009-09-11
- 性别: GG
- 专业: 流行病学方法与卫生统计
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看天(金币+4): 鼓励回答 2011-08-18 23:50:56
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看天(金币+4): 鼓励回答 2011-08-18 23:50:56
|
gDNA降解无非两个原因： 1.细胞内DNA酶作用于gDNA，你的材料在放入提取液前没有在细胞破碎的情况下放久吧？ 2.机械力作用：有很剧烈的长时间涡旋吗？或者之类的。但一般也不会有事。 另外，至于PH，水饱和酚（PH4）条件下，gDNA溶于有机相，应该提不出来。TRIS饱和酚，如果过期也是蛋白除不尽。我觉得应该不是酚的问题。 我看你第二张图最后一孔gDNA正常，没降解。是同同批次，同操作吗？如果是，说明操作失误。 我的解决方法是：不要再去想了（这个实验真的很难做出降解  ）。换一个方法，买一个kit，gDNA提取试剂盒很便宜的。 |
6楼2011-08-18 19:14:12
silicare
荣誉版主 (文坛精英)
合伙创业版兼职版主
- BioEPI: 14
- 应助: 88 (初中生)
- 贵宾: 29.823
- 金币: 18946.3
- 散金: 24272
- 红花: 300
- 沙发: 88
- 帖子: 10222
- 在线: 1602.6小时
- 虫号: 948825
- 注册: 2010-01-26
- 专业: 摩尼教
- 管辖: 新药研发
2楼2011-08-18 14:27:01
3楼2011-08-18 17:38:06
4楼2011-08-18 17:39:01