| 查看: 6181 | 回复: 41 | |||
[交流]
为什么提取的DNA总是降解？ 已有27人参与
|
|||
各位大侠，为什么我提取的DNA总是降解呢？用的是传统的苯酚-氯仿抽提的方法，最后一步加入冰乙醇沉淀的时候能看到大量的絮状沉淀，TE溶解过夜，琼脂糖胶检测时条带却是这样(如图）。分光光度计检测浓度和纯度都正常。实验室几个人提取都是这样，不知道是什么原因，所用的试剂已经重新配过，还是这个结果。请问有没有遇到过类似情况的，这是什么原因，怎么解决呢？请大家指点帮助~  |
回复此楼» 猜你喜欢
求调剂
已经有3人回复
-
265求调剂
已经有4人回复
-
085700资源与环境308求调剂
已经有6人回复
-
一志愿吉林大学材料学硕321求调剂
已经有12人回复
-
286分人工智能专业请求调剂愿意跨考！
已经有3人回复
-
329求调剂
已经有5人回复
-
申请回稿延期一个月，编辑同意了。但系统上的时间没变，给编辑又写邮件了，没回复
已经有4人回复
-
材料学硕318求调剂
已经有5人回复
-
一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂
已经有6人回复
-
081700化工学硕调剂
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 小鼠肝脏基因组DNA提取大部分降解为300-500bp了
已经有11人回复
- 提取RNA时，为何会有DNA条带，并且有且只有一条带？
已经有9人回复
- 为什么DNA提取总降解
已经有15人回复
- 【求助/交流】提取的DNA降解了？？
已经有16人回复
- 【求助/交流】氯化苄提取酵母DNA，DNA降解的厉害，求高人指点！！！
已经有4人回复
- 【求助/交流】提取的DNA纯度不好
已经有10人回复
- 【求助/交流】为什么内切酶总是切不开我的DNA
已经有14人回复
silicare
荣誉版主 (文坛精英)
合伙创业版兼职版主
- BioEPI: 14
- 应助: 88 (初中生)
- 贵宾: 29.823
- 金币: 18946.3
- 散金: 24272
- 红花: 300
- 沙发: 88
- 帖子: 10222
- 在线: 1602.6小时
- 虫号: 948825
- 注册: 2010-01-26
- 专业: 摩尼教
- 管辖: 新药研发
2楼2011-08-18 14:27:01
29楼2012-03-23 18:53:46
39楼2014-11-24 10:39:34
3楼2011-08-18 17:38:06
4楼2011-08-18 17:39:01
silicare
荣誉版主 (文坛精英)
合伙创业版兼职版主
- BioEPI: 14
- 应助: 88 (初中生)
- 贵宾: 29.823
- 金币: 18946.3
- 散金: 24272
- 红花: 300
- 沙发: 88
- 帖子: 10222
- 在线: 1602.6小时
- 虫号: 948825
- 注册: 2010-01-26
- 专业: 摩尼教
- 管辖: 新药研发
5楼2011-08-18 18:08:52
adslye
银虫 (正式写手)
- BioEPI: 10
- 应助: 6 (幼儿园)
- 贵宾: 0.244
- 金币: 364.9
- 散金: 766
- 红花: 6
- 帖子: 514
- 在线: 119.5小时
- 虫号: 845336
- 注册: 2009-09-11
- 性别: GG
- 专业: 流行病学方法与卫生统计
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看天(金币+4): 鼓励回答 2011-08-18 23:50:56
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看天(金币+4): 鼓励回答 2011-08-18 23:50:56
|
gDNA降解无非两个原因： 1.细胞内DNA酶作用于gDNA，你的材料在放入提取液前没有在细胞破碎的情况下放久吧？ 2.机械力作用：有很剧烈的长时间涡旋吗？或者之类的。但一般也不会有事。 另外，至于PH，水饱和酚（PH4）条件下，gDNA溶于有机相，应该提不出来。TRIS饱和酚，如果过期也是蛋白除不尽。我觉得应该不是酚的问题。 我看你第二张图最后一孔gDNA正常，没降解。是同同批次，同操作吗？如果是，说明操作失误。 我的解决方法是：不要再去想了（这个实验真的很难做出降解  ）。换一个方法，买一个kit，gDNA提取试剂盒很便宜的。 |
6楼2011-08-18 19:14:12
rioarsenal
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 675
- 帖子: 394
- 在线: 44.7小时
- 虫号: 1169059
- 注册: 2010-12-13
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
7楼2011-08-18 21:52:24
hqc87
铁虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1232.4
- 散金: 1198
- 红花: 1
- 帖子: 110
- 在线: 89.1小时
- 虫号: 867886
- 注册: 2009-10-10
- 专业: 植物生理与生化
8楼2011-08-18 22:50:18
wqj1988926
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 40 (小学生)
- 金币: 1222
- 散金: 27
- 红花: 5
- 帖子: 929
- 在线: 225.6小时
- 虫号: 1156883
- 注册: 2010-11-27
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
9楼2011-08-19 08:33:33
10楼2011-08-19 08:48:50
