24小时热门版块排行榜    

查看: 6074  |  回复: 9

31569218

木虫 (正式写手)

[交流] 提取RNA时,为何会有DNA条带,并且有且只有一条带? 已有9人参与

提取RNA时,为何会有DNA条带,并且有且只有一条带?
我用的是试剂盒提取的,按理说不应该啊
操作很严格的啊,同实验室的野提了一样的结果
求助了
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

爱之深痛之切
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-06-20 17:03:22
试剂盒提取也经常是有DNA污染的,我们加一个DNase处理。
2楼2011-06-20 10:51:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

475502411

铜虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-06-20 16:30:47
你用的枪头和EP管有没有处理过啊?是不是操作过程中RNA降解了?条带应该是污染,没有RNA的三条条带说明是降解,不过如果降解也应该有5S的条带啊,不可能就DNA条带的
可以朝九晚五,也能浪迹天涯
3楼2011-06-20 14:11:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbwalkman

木虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-06-20 19:17:52
会不会是污染降解了
4楼2011-06-20 15:23:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oyzh

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-06-20 17:03:33
DNA酶一般在经销商那边是和试剂盒分开保存的,送货的时候如果业务员没有把DNA酶放在冰盒中送过来,就可以拒收。

想想一个1300元左右的RNA提取试剂盒,DNA酶(单独购买)就占到800元。
5楼2011-06-20 16:37:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

beautybanana

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+4): 专家出手了 2011-06-20 21:11:56
不知道你提的是什么样品,有的提出来了不一定会跑变性胶,所以条带会有所不同,你提好后先测下OD值,OD260/OD280。一般为1.8-2.0之间,RNA中蛋白或者是其他有机物的污染是可以接受,不过要注意,当你用Tris作为缓冲液检测吸光度时,R值可能会大于2(一般应该是<2.2的)。当R<1.8时,溶液中蛋白或者时其他有机物的污染比较明显。当R>2.2时,说明RNA已经水解成单核酸了。
检测好,你可以反转录下试试看能不能扩增到你的目的基因片段,我从资料上也有看到用一般的琼脂糖电泳液可以,但是提RNA的时候要防止RNase的降解作用,电泳一段时间就要去观察以免久了看不见~
6楼2011-06-20 20:07:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wkw1001

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
请问楼上高手为什么电泳久了会看不见呢?
7楼2011-12-30 17:28:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

植物园园长

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
看样子是降解了。
如果你的样本不是新鲜的,建议同时做一个新鲜叶片的RNA提取对照,如果新鲜的提出来了,而你的还是没提出来,很可能RNA在你现在的叶片中就降解了,就不用再提了,重新换新鲜样本来做。
在路上~~Marketing!
8楼2012-05-31 15:45:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanghd2826

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
lz莫担心,这种情况很正常,用DNAase纯化下即可。一般来说RNA试剂盒都说能避免DNA污染,但是实际情况还是因样品种类而异,我身边的同学有做动物也有做植物的,提取RNA也都是用的试剂盒,但是都有不同程度的DNA污染,这并不碍事,只要你的28s和18s完整,OD值ok那就没问题,用DNAase消化一下继续做RT就可以。
9楼2012-05-31 16:15:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

13579_t

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问楼主最后分析出来原因了么?我今天也遇到这样的问题~
fighting
10楼2014-07-21 17:07:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 31569218 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 72/3600 2026-08-16 13:15 by 医学老男孩
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见