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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取RNA时，为何会有DNA条带，并且有且只有一条带？
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31569218

木虫 (正式写手)

[交流] 提取RNA时，为何会有DNA条带，并且有且只有一条带？ 已有9人参与

提取RNA时，为何会有DNA条带，并且有且只有一条带？
我用的是试剂盒提取的，按理说不应该啊
操作很严格的啊，同实验室的野提了一样的结果
求助了
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爱之深痛之切
1楼 2011-06-20 10:10:46
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beautybanana

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
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西瓜(金币+4): 专家出手了 2011-06-20 21:11:56
不知道你提的是什么样品，有的提出来了不一定会跑变性胶，所以条带会有所不同，你提好后先测下OD值，OD260/OD280。一般为1.8-2.0之间，RNA中蛋白或者是其他有机物的污染是可以接受，不过要注意，当你用Tris作为缓冲液检测吸光度时，R值可能会大于2（一般应该是<2.2的）。当R<1.8时，溶液中蛋白或者时其他有机物的污染比较明显。当R>2.2时，说明RNA已经水解成单核酸了。
检测好，你可以反转录下试试看能不能扩增到你的目的基因片段，我从资料上也有看到用一般的琼脂糖电泳液可以，但是提RNA的时候要防止RNase的降解作用，电泳一段时间就要去观察以免久了看不见~
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6楼2011-06-20 20:07:49
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
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1949stone(金币+1): 鼓励 2011-06-20 17:03:22
试剂盒提取也经常是有DNA污染的，我们加一个DNase处理。
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2楼2011-06-20 10:51:29
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475502411

铜虫 (著名写手)
★ ★ ★
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amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-06-20 16:30:47
你用的枪头和EP管有没有处理过啊？是不是操作过程中RNA降解了？条带应该是污染，没有RNA的三条条带说明是降解，不过如果降解也应该有5S的条带啊，不可能就DNA条带的
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
3楼2011-06-20 14:11:49
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bbwalkman

木虫 (小有名气)
★ ★
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1949stone(金币+1): 鼓励 2011-06-20 19:17:52
会不会是污染降解了
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4楼2011-06-20 15:23:05
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