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qufuhxd

新虫 (初入文坛)

[交流] 提DNA时在异丙醇中加入氯仿异戊醇会有什么影响? 已有6人参与

在提DNA的时候不小心把放异丙醇的瓶子里加入了氯仿异戊醇,加入这样的异丙醇会有什么影响?加完后还是分了两层,能不能离心继续取上清再加异丙醇?
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ycczy111

金虫 (正式写手)

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不行的 ,加入异丙醇会使DNA沉淀,离心后DNA和氯仿异戊醇一起沉到底部,这样取上清就没有意义了,还是重提吧
2楼2013-03-24 21:03:07
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无疆@行者

银虫 (小有名气)

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不一定吧,异丙醇应该是溶解在有机层,不一定是DNA沉淀。LZ可以尝试一下
3楼2013-03-24 21:12:05
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tianchi2952

铜虫 (小有名气)

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生物学试验特别是操作核酸基因蛋白质的试验,犯这种常识性的错误实在是不应该的........
益学善用
4楼2013-03-25 13:00:16
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mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)

★
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异丙醇沉淀应该是在氯仿异戊醇后面一步,你 现在是将氯仿异戊醇当做异丙醇加进去了,相当于把抽提步骤多做了一,应该可以补救的,就是继续离心取上清,然后再加异丙醇沉淀,就是抽提得到的体积少了。做实验犯错是难免的,常识性的错误也会犯,但是要学会分析问题及时补救。我们都是在不断犯错中成长的。祝你好运。
5楼2013-03-25 20:42:49
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DoRbIr

金虫 (正式写手)

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这事有点乱,一堆互溶的东西跑一起去了,就说不清楚了啊
6楼2013-03-26 23:14:51
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进步一点点

至尊木虫 (知名作家)

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应该不会有啥影响,氯仿异戊醇是用来除去蛋白的,异丙醇是用来沉淀DNA的,混着加的话一部分异丙醇会溶到氯仿异戊醇相中,可能会让蛋白和核酸沉到一起,也可能因为异丙醇量减少会使沉淀的效果差些,上清重加异丙醇试一试吧。个人观点啊

[ Last edited by 进步一点点 on 2013-3-27 at 02:08 ]
科研穷三代,读博毁一生
7楼2013-03-27 02:05:00
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