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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 提DNA时在异丙醇中加入氯仿异戊醇会有什么影响？
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qufuhxd

新虫 (初入文坛)

[交流] 提DNA时在异丙醇中加入氯仿异戊醇会有什么影响？ 已有6人参与

在提DNA的时候不小心把放异丙醇的瓶子里加入了氯仿异戊醇，加入这样的异丙醇会有什么影响？加完后还是分了两层，能不能离心继续取上清再加异丙醇？
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1楼 2013-03-24 20:47:55
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ycczy111

金虫 (正式写手)
★
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不行的 ，加入异丙醇会使DNA沉淀，离心后DNA和氯仿异戊醇一起沉到底部，这样取上清就没有意义了，还是重提吧
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2楼2013-03-24 21:03:07
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无疆@行者

银虫 (小有名气)
★
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不一定吧，异丙醇应该是溶解在有机层，不一定是DNA沉淀。LZ可以尝试一下
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3楼2013-03-24 21:12:05
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tianchi2952

铜虫 (小有名气)
★
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生物学试验特别是操作核酸基因蛋白质的试验，犯这种常识性的错误实在是不应该的........
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益学善用
4楼2013-03-25 13:00:16
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mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)
★
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异丙醇沉淀应该是在氯仿异戊醇后面一步，你 现在是将氯仿异戊醇当做异丙醇加进去了，相当于把抽提步骤多做了一，应该可以补救的，就是继续离心取上清，然后再加异丙醇沉淀，就是抽提得到的体积少了。做实验犯错是难免的，常识性的错误也会犯，但是要学会分析问题及时补救。我们都是在不断犯错中成长的。祝你好运。
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5楼2013-03-25 20:42:49
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DoRbIr

金虫 (正式写手)
★
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这事有点乱，一堆互溶的东西跑一起去了，就说不清楚了啊
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6楼2013-03-26 23:14:51
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进步一点点

至尊木虫 (知名作家)
★
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应该不会有啥影响，氯仿异戊醇是用来除去蛋白的，异丙醇是用来沉淀DNA的，混着加的话一部分异丙醇会溶到氯仿异戊醇相中，可能会让蛋白和核酸沉到一起，也可能因为异丙醇量减少会使沉淀的效果差些，上清重加异丙醇试一试吧。个人观点啊

[ Last edited by 进步一点点 on 2013-3-27 at 02:08 ]
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科研穷三代，读博毁一生
7楼2013-03-27 02:05:00
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