应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】异硫氰酸胍法提取植物RNA中DNA残留问题~回帖就送币！！！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
151/2返回列表12下一页
查看: 4088  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

adslye

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】异硫氰酸胍法提取植物RNA中DNA残留问题~回帖就送币！！！

我是用异硫氰酸胍法提RNA。大概过程：
异硫氰酸胍提取液提取----酚氯仿异戊醇（提2次）再氯仿异戊醇提1次------异丙醇沉淀---乙醇洗。
RNA都能提出来（260/280:1.73），有点降解，也有DNA污染。
现在不知道DNA主要在哪污染的？是酚氯仿萃取的时候除DNA吧。
各位，除了用DNA酶处理，还有什么办法？
或者是你们提的办法？

回帖就送金币！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-10-28 10:41:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

adslye

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-10-28 11:53:23:
PH值多少？

PH4.0的 提取液和醋酸钠都是4.0。 酚就直接用的水饱和的，具体精确的PH就不知道了。我也感觉PH有问题。
分开DNA就靠这PH了。离心后，吸上清应该操作没问题，到中间了都会宁愿浪费点也不吸了。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-10-28 21:53:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
adslye(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-28 12:03:35
就我的经验，提RNA时有DNA的污染时很难避免的。一般就用DNA酶处理。酚氯仿萃取对去DNA没有作用。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-10-28 10:53:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
adslye(金币+1):谢谢参与
PH值多少？
回复此楼
3楼2010-10-28 11:53:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuxian1

银虫 (小有名气)
★ ★
adslye(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-10-28 22:37:25
在RNA的提取过程要避免剧烈振荡，使得蛋白和DNA脱离，DNA会释放到水相。不管有酚也好，没有酚也好，氯仿本身也对蛋白有变性作用，剧烈的震荡，很容易使得DNA的亲水基团，与水相接触。所以不要剧烈震荡。
赞一下(2人) 回复此楼
我与你一起闯天下
4楼2010-10-28 13:38:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ww9928

新虫 (初入文坛)
★
adslye(金币+1):谢谢参与
多提几管，先用TRIZOL提一遍，几管合起来，加DNA酶消化，之后再从头提一遍，基本就可以了
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-10-28 13:58:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gastrodia

金虫 (正式写手)
★ ★
adslye(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-10-28 22:38:08
发好文章都需要用DNA酶处理的，你不想处理，做realtime类似的检测只能靠跨内含子的引物，或者UTP的金牌酶了
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2010-10-28 22:02:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
adslye(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-10-28 22:38:16
恩，一般都是DNA酶处理的，呵呵，毕竟后面要做反转定量嘛，相对而言后面的试剂要贵很多，而且时间也浪费不起，所以前面的DNA酶一定是要加的。
赞一下(2人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
8楼2010-10-28 22:08:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangfangwh

银虫 (著名写手)
★
adslye(金币+1):谢谢参与
no ide.......
回复此楼
go head
9楼2010-10-28 22:33:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

singingriver

金虫 (正式写手)
★
adslye(金币+1):谢谢参与
学习一下啊
回复此楼
有志者事竟成
10楼2010-10-28 22:59:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 adslye 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 331求调剂 +7 于征yz 2026-04-05 7/350 2026-04-05 23:26 by 来看流星雨10
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:29 by 啵啵啵0119
[考研] 0854电子信息319求调剂（接受跨专业调剂） +3 星星不眨眼喽 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:20 by 啵啵啵0119
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +10 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-04 10/500 2026-04-05 18:51 by 蓝云思雨
[考研] 307分材料专业求调剂 +7 Hll胡 2026-04-05 7/350 2026-04-05 18:47 by 无际的草原
[考研] 材料专硕 调剂 +14 CXN123456 2026-04-03 14/700 2026-04-05 17:18 by Hdyxbekcb
[考研] 313求调剂 +5 海日海日 2026-04-04 5/250 2026-04-05 15:52 by jndximd
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业083200 +4 what张 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:07 by chw1980_0
[考研] 283分求调剂 +9 试试看呗 2026-04-04 9/450 2026-04-05 10:27 by 果冻大王
[考研] 301求调剂 +12 121. 2026-04-04 12/600 2026-04-05 09:00 by 来看流星雨10
[考研] 083200 333求调剂 +3 十二！！ 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:28 by barlinike
[考研] 290求调剂 +7 luoziheng 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:17 by lqwchd
[考研] 323求调剂 +8 李佳乐1 2026-04-04 8/400 2026-04-04 22:26 by hemengdong
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-03 4/200 2026-04-04 22:17 by hemengdong
[考研] 298求调剂 +5 zzz，，r 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:55 by 蓝云思雨
[考研] 302求调剂一志愿华中师范大学 +8 小江小江江江 2026-04-02 8/400 2026-04-04 19:50 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂机会 +5 意染ivy 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:13 by qoooooo614
[考研] 求调剂！生物与医药专硕 +4 逆转陆先生 2026-04-01 5/250 2026-04-03 08:33 by Jaylen.
[考研] 0856材料与化工调剂，339 +14 10213207 2026-03-31 14/700 2026-04-02 21:01 by 1104338198
[考研] 350求调剂 +7 阿佳～ 2026-03-31 7/350 2026-04-01 16:12 by yanflower7133
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭