应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】异硫氰酸胍法提取植物RNA中DNA残留问题~回帖就送币！！！
151/2返回列表12下一页
查看: 4525  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

adslye

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】异硫氰酸胍法提取植物RNA中DNA残留问题~回帖就送币！！！

我是用异硫氰酸胍法提RNA。大概过程：
异硫氰酸胍提取液提取----酚氯仿异戊醇（提2次）再氯仿异戊醇提1次------异丙醇沉淀---乙醇洗。
RNA都能提出来（260/280:1.73），有点降解，也有DNA污染。
现在不知道DNA主要在哪污染的？是酚氯仿萃取的时候除DNA吧。
各位，除了用DNA酶处理，还有什么办法？
或者是你们提的办法？

回帖就送金币！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-10-28 10:41:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

adslye

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-10-28 11:53:23:
PH值多少？

PH4.0的 提取液和醋酸钠都是4.0。 酚就直接用的水饱和的，具体精确的PH就不知道了。我也感觉PH有问题。
分开DNA就靠这PH了。离心后，吸上清应该操作没问题，到中间了都会宁愿浪费点也不吸了。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-10-28 21:53:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
adslye(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-28 12:03:35
就我的经验，提RNA时有DNA的污染时很难避免的。一般就用DNA酶处理。酚氯仿萃取对去DNA没有作用。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-10-28 10:53:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
adslye(金币+1):谢谢参与
PH值多少？
回复此楼
3楼2010-10-28 11:53:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuxian1

银虫 (小有名气)
★ ★
adslye(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-10-28 22:37:25
在RNA的提取过程要避免剧烈振荡，使得蛋白和DNA脱离，DNA会释放到水相。不管有酚也好，没有酚也好，氯仿本身也对蛋白有变性作用，剧烈的震荡，很容易使得DNA的亲水基团，与水相接触。所以不要剧烈震荡。
赞一下(2人) 回复此楼
我与你一起闯天下
4楼2010-10-28 13:38:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ww9928

新虫 (初入文坛)
★
adslye(金币+1):谢谢参与
多提几管，先用TRIZOL提一遍，几管合起来，加DNA酶消化，之后再从头提一遍，基本就可以了
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-10-28 13:58:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gastrodia

金虫 (正式写手)
★ ★
adslye(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-10-28 22:38:08
发好文章都需要用DNA酶处理的，你不想处理，做realtime类似的检测只能靠跨内含子的引物，或者UTP的金牌酶了
赞一下(2人) 回复此楼
7楼2010-10-28 22:02:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★ ★
adslye(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-10-28 22:38:16
恩，一般都是DNA酶处理的，呵呵，毕竟后面要做反转定量嘛，相对而言后面的试剂要贵很多，而且时间也浪费不起，所以前面的DNA酶一定是要加的。
赞一下(2人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
8楼2010-10-28 22:08:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangfangwh

银虫 (著名写手)
★
adslye(金币+1):谢谢参与
no ide.......
回复此楼
go head
9楼2010-10-28 22:33:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

singingriver

金虫 (正式写手)
★
adslye(金币+1):谢谢参与
学习一下啊
回复此楼
有志者事竟成
10楼2010-10-28 22:59:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 adslye 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +6 雨打竹帘 2026-08-30 10/500 2026-08-31 09:29 by huixian257
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭