24小时热门版块排行榜    

查看: 1768  |  回复: 6

yixinyuan

木虫 (正式写手)

[求助] 关于质粒大量提取的方法求助

最近用到实验室的一种质粒大量提取试剂盒:有这么一个操作步骤,“溶液1,,2,3操作后离心去上清液加冰预冷的异丙醇(0.6倍体积),沉淀一段时间后,离心,收集沉淀,用ddH2O 溶解后加等体积结合缓冲液,加入离心吸附柱”,实际上沉淀已经得到了质粒DNA ,在经过多次漂洗,难道不能得到较纯的质粒DNA 吗?经过一步离心吸附,也会损失不少质粒啊!还有就是现在市面常见的大提试剂盒最终得率怎么样啊?各自都有哪些标准数据来体现得率?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

燕子9883

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yixinyuan: 金币+2, ★有帮助 2012-07-14 22:19:29
得率不知道,但是如果只用异丙醇沉淀的话,DNA是很杂的。
2楼2012-07-14 17:58:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

123n

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yixinyuan: 金币+2, ★有帮助 2012-07-14 22:21:19
亲,还要用氯仿哦!  不能光用异丙醇,效果不好!   大体质粒的效果很好的~~
3楼2012-07-14 21:07:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixinyuan

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 燕子9883 at 2012-07-14 17:58:56
得率不知道,但是如果只用异丙醇沉淀的话,DNA是很杂的。

沉淀得到的DNA 确实很多杂质,那我还得加入其它什么试剂配合异丙醇来沉淀呢?怎么做呢?
4楼2012-07-14 22:18:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixinyuan

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 123n at 2012-07-14 21:07:21
亲,还要用氯仿哦!  不能光用异丙醇,效果不好!   大体质粒的效果很好的~~

氯仿要怎么样加入?跟异丙醇一起混合么?什么比例呢?
5楼2012-07-14 22:21:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jl860822

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yixinyuan: 金币+2, ★有帮助 2012-07-15 22:39:19
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-07-16 13:56:38
大抽质粒的效果很好的,沉淀得到的产物可能杂质比较多,因此会重新溶解并再次结合上柱,这个过程损失肯定是会有的,但是平时小量抽的话,一般我们都会二次上柱,所以对得率影响不是很大
6楼2012-07-15 12:05:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lt7510578

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yixinyuan: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-07-16 21:20:26
本人一般质粒手提,试剂盒很少用,中间一步是氯仿/异戊醇=24:1混合抽提蛋白杂质,效果也行
7楼2012-07-16 13:40:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yixinyuan 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 16:52 by Z9YWQ5EAO3qp
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 16:33 by Z9YWQ5EAO3qp
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-29 19:27 by cqwQDCxMcL3I
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:37 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:46 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:24 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 7/350 2026-09-29 14:07 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 3/150 2026-09-29 13:56 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 09:59 by JzYBbHIXWSrW
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[找工作] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
请填处理意见