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wozha

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】质粒提取中的一点问题 已有11人参与

最近一直在提质粒,可能很简单 但是我一直没做出结果,使用的是biomiga的试剂盒,中间有一部加如buffer B1,翻转10次,总是掌握不好,大概就是动作太大?看别人都是几秒才翻转90度的,总之 提完,电泳 ——空白,很打击人的

补充说明一点,菌是野生菌,水体里直接浓缩的,大约10L水浓缩至10ml这样,以前用biomiga的盒子,今天换了promega的又提了一下,还是没有……很打击人
本文来自: 小木虫论坛 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2280831&fpage=0&view=&highlight=&page=2

[ Last edited by wozha on 2010-8-16 at 10:53 ]
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被太阳追逐

新虫 (初入文坛)


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应该不是提取方法的问题  质粒提取没那么严格 你应该检查一下你的菌种
2楼2010-08-06 20:24:32
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sqhnsd

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
菌种可能有问题,你问问你们实验室其他同学提质粒有没有问题?一般质粒提取试剂盒都很稳定的。
3楼2010-08-06 21:23:15
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yujiaping1

木虫 (著名写手)


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可能根本没有转染进去质粒,而抗性又有问题
4楼2010-08-06 22:01:02
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xwq8330

金虫 (小有名气)


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加进去合适的抗生物,如果没转进去,肯定不会长的,抗生物最好新配置,防止失效
5楼2010-08-06 23:17:07
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周_yan

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
应该是菌种的问题,活力可能不高,应该活化几次再提或者换一个克隆。
6楼2010-08-07 08:43:22
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evebobo

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
提质粒用碱裂解法 挺简单的  很容易提出来  我前几天还做了  觉得提的很烂 可是提了8个都出了  考虑下别的问题吧 应该不是提的问题
7楼2010-08-09 11:29:08
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云泽紫樱

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用试剂盒提的应该没什么问题吧,是不是菌种有问题啊?
“幸福”就是猫吃鱼,狗吃肉,奥特曼打小怪兽~
8楼2010-08-09 13:52:48
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fykxy_206

木虫 (正式写手)

拿你的试剂盒提你同学提出质粒的菌种试试就知道了。
9楼2010-08-09 15:50:42
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guixiaohua

禁虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-08-09 19:31:08
本帖内容被屏蔽

10楼2010-08-09 18:47:11
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