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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】质粒提取中的一点问题
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wozha

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】质粒提取中的一点问题 已有11人参与

最近一直在提质粒，可能很简单 但是我一直没做出结果，使用的是biomiga的试剂盒，中间有一部加如buffer B1，翻转10次，总是掌握不好，大概就是动作太大？看别人都是几秒才翻转90度的，总之 提完，电泳 ——空白，很打击人的

补充说明一点，菌是野生菌，水体里直接浓缩的，大约10L水浓缩至10ml这样，以前用biomiga的盒子，今天换了promega的又提了一下，还是没有……很打击人
本文来自: 小木虫论坛 http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2280831&fpage=0&view=&highlight=&page=2

[ Last edited by wozha on 2010-8-16 at 10:53 ]
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1楼 2010-08-06 20:09:48
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被太阳追逐

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该不是提取方法的问题  质粒提取没那么严格 你应该检查一下你的菌种
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2楼2010-08-06 20:24:32
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sqhnsd

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
菌种可能有问题，你问问你们实验室其他同学提质粒有没有问题？一般质粒提取试剂盒都很稳定的。
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3楼2010-08-06 21:23:15
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能根本没有转染进去质粒，而抗性又有问题
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4楼2010-08-06 22:01:02
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xwq8330

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
加进去合适的抗生物，如果没转进去，肯定不会长的，抗生物最好新配置，防止失效
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5楼2010-08-06 23:17:07
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周_yan

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该是菌种的问题，活力可能不高，应该活化几次再提或者换一个克隆。
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6楼2010-08-07 08:43:22
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evebobo

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
提质粒用碱裂解法 挺简单的  很容易提出来  我前几天还做了  觉得提的很烂 可是提了8个都出了  考虑下别的问题吧 应该不是提的问题
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7楼2010-08-09 11:29:08
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云泽紫樱

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用试剂盒提的应该没什么问题吧，是不是菌种有问题啊？
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“幸福”就是猫吃鱼，狗吃肉，奥特曼打小怪兽~
8楼2010-08-09 13:52:48
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fykxy_206

木虫 (正式写手)
拿你的试剂盒提你同学提出质粒的菌种试试就知道了。
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9楼2010-08-09 15:50:42
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guixiaohua

禁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-08-09 19:31:08
本帖内容被屏蔽
10楼2010-08-09 18:47:11
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